5. Blanc de réactifs :
• Prendre 50ml d’eau distillée et ajouter 5ml de mélange réactif. Ce blanc n’est pas
négligeable et doit être mesuré à chaque série d’analyse.
Annexe E :
1. Les réactifs utilisés pour le dosage de l’ammonium :
Réactif 1 : Solution de phénol-nitroprussiate :
• Dissoudre 70g de phénol et 100mg de nitroprussiate de sodium (Na 2 Fe(NC)
5NO, 2H 2 O) dans 250ml d’eau distillée.
Réactif 2 : Solution alcaline d’hypochlorite :
• Dissoudre 70g de citrate trisodique (Na 3 C 6 H 5 O , 2H 2 O) et 5.5g de soude dans
200ml d’eau distillée.
• Ajouter 11 ml de solution d’hypochlorite de sodium à 10°.
• Compléter à 250ml.
Solution étalon primaire d’ammonium :
• Dissoudre 0.165g de sulfate d’ammonium dans 250ml d’eau distillée.
Solution étalon secondaire d’ammonium :
• Diluer 20 fois la solution étalon primaire. Ajouter 1ml du chloroforme, (12.5ml
de la solution primaire compléter à 250ml avec de l’eau distillée.
2. Mode opératoire :
• Prendre 50ml d’échantillon dans un flacon.
• Ajouter 2ml de réactif 1 et agiter.
• Ajouter 2ml de réactif 2 et agiter.
• Les flacons sont conservés pendant une nuit et à l’abri de la lumière.
• Mesurer l’absorbance à 630nm.
3. Etalonnage :
• Dans des fioles jaugées de 100ml, on introduit 0.5-5-10-80-120ml de la
solution étalon secondaire et compléter à 100ml avec de l’eau distillée pour
obtenir la gamme d’étalonnage : 0.5-5-10-80-120µmol/l.
• Retrancher des mesures d’absorbance la valeur obtenue avec l’eau distillée et
tracer la courbe d’étalonnage.