Acide sulfurique 2.5mol/l :
• Dans une bouteille de verre, ajouter petit à petit avec précaution, 70ml d’acide
sulfurique (densité=1.84) dans 450ml d’eau distillée et laisser refroidir.
Solution d’acide ascorbique :
• Dissoudre 57g d’acide ascorbique (C 6 H 8 O 6 ) dans 250ml d’eau distillée.
Solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine :
• Dissoudre 0.34g d’oxytartrate de potassium et d’antimoine(3), K(SbO) CH 4 O 6 dans
250ml d’eau distilleé.Elle est d’une concentration de 1.36g/l.
2. Mélange réactifs :
Mélanger les réactifs ci-dessus dans les proportions suivantes :
• 100ml de solution de molybdate d’ammonium.
• 250ml d’acide sulfurique 2.5 mol/l
• 100ml de solution d’acide ascorbique.
• 50ml de solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine.
Solution étalon primaire de phosphate :
• Dissoudre 0.680g dans 1l d’eau distillée et ajouter 1ml de chloroforme.1ml de PO 4
3contient 5µmol de PO 4
3. Donc la concentration de la solution est de 0.5mol/l.
Solution étalon secondaire de phosphate :
• Diluer 100 fois la solution étalon primaire : 10ml compléter à 1000ml de l’eau distillée
avec 1ml de chloroforme.
3. Mode opératoire :
On procéder comme suite :
• Préparer le mélange réactif.
• Mesurer 50ml d’échantillon.
• Ajouter 5ml du mélange réactifs et homogénéiser.
• Attendre 5 min et mesurer l’absorbance à 885nm.
4. Etalonnage
• Introduire dans des fioles jaugée de 100ml, 2-10-20-100ml de solution étalon secondaire
et compléter à 100ml avec de l’eau distillée pour obtenir la gamme de concentration
suivante :0.2-1-2-10µmol/l.
• Retrancher des mesures d’absorbance la valeur obtenue avec l’eau distillée plus le blanc
de réactifs et tracer la courbe d’étalonnage.
• Dans une bouteille de verre, ajouter petit à petit avec précaution, 70ml d’acide
sulfurique (densité=1.84) dans 450ml d’eau distillée et laisser refroidir.
Solution d’acide ascorbique :
• Dissoudre 57g d’acide ascorbique (C 6 H 8 O 6 ) dans 250ml d’eau distillée.
Solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine :
• Dissoudre 0.34g d’oxytartrate de potassium et d’antimoine(3), K(SbO) CH 4 O 6 dans
250ml d’eau distilleé.Elle est d’une concentration de 1.36g/l.
2. Mélange réactifs :
Mélanger les réactifs ci-dessus dans les proportions suivantes :
• 100ml de solution de molybdate d’ammonium.
• 250ml d’acide sulfurique 2.5 mol/l
• 100ml de solution d’acide ascorbique.
• 50ml de solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine.
Solution étalon primaire de phosphate :
• Dissoudre 0.680g dans 1l d’eau distillée et ajouter 1ml de chloroforme.1ml de PO 4
3contient 5µmol de PO 4
3. Donc la concentration de la solution est de 0.5mol/l.
Solution étalon secondaire de phosphate :
• Diluer 100 fois la solution étalon primaire : 10ml compléter à 1000ml de l’eau distillée
avec 1ml de chloroforme.
3. Mode opératoire :
On procéder comme suite :
• Préparer le mélange réactif.
• Mesurer 50ml d’échantillon.
• Ajouter 5ml du mélange réactifs et homogénéiser.
• Attendre 5 min et mesurer l’absorbance à 885nm.
4. Etalonnage
• Introduire dans des fioles jaugée de 100ml, 2-10-20-100ml de solution étalon secondaire
et compléter à 100ml avec de l’eau distillée pour obtenir la gamme de concentration
suivante :0.2-1-2-10µmol/l.
• Retrancher des mesures d’absorbance la valeur obtenue avec l’eau distillée plus le blanc
de réactifs et tracer la courbe d’étalonnage.