CHAPITRE II: Matériels et Méthodes
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Le mode opératoire est comme suit : dans un flacon en polyéthylène contenant l’échantillon et
à l'aide d'un gaz vecteur (Argon) sous une pression de 2,8 bars, on amène le (NaB ).
L'hydrogène libéré, réduit les ions métalliques en hydrures volatiles dans une cellule en quartz
à partir de laquelle l'absorption du métal est mesurée.
• Flamme air acétylène : Concernant les métaux essentiels aux concentrations relativement
importantes (Zn), nous avons utilisé la méthode de flamme air acétylène. La surface de
l'échantillon est exposée au nébuliseur sous l’action d'un gaz. Celui-ci produit un aérosol qui
va être dissocié en atomes par une flamme qui absorbe la lumière émise sous forme de
radiation de chaque élément constituant la lampe.
• Four à graphite : Les éléments métalliques à concentrations relativement faibles sont
analysés à l'aide d'un four à graphite (Cd, Pb... etc). C'est un four en graphite de revêtement
pyrolytique interne. Le modèle utilisé est de type «HGA 500 » de Perkin Elmer. Le principe
repose sur la volatilisation des échantillons par atomisation dans un four suivant trois cycles
de montées de température. 10µl de chaque échantillon sont injectés automatiquement dans le
four. Après écoulement du temps de montées de température programmée, l'absorption
relative est enregistrée.
II.2.2.10. Etalonnage
L'étalonnage doit être réalisé très soigneusement, dans un domaine de concentration où
la loi de Béer Lambert est respectée (Tableau 2.2). La mesure de la concentration d'un
élément dans l'échantillon est déterminée à partir d'une courbe d'étalonnage. La gamme
d'étalonnage doit autant que possible être comprise autour de valeurs de l'échantillon analysé.
Les solutions étalons sont préparées à partir de solution mère qui a une concentration connue
en g/l de l'élément à doser. Les standards ne sont préparés qu'au moment de l'analyse.
Tableau 2.2. Concentration des solutions standards utilisées
Métaux
Concentration en µg / ml
S1
S2
S3
Hg
5
10
15
Zn
1000
2000
3000
II.2.2.11. Calcul des concentrations des métaux lourds
Pour obtenir les concentrations des métaux lourds étudiés, nous avons établi l'équation
droite d'étalonnage par régression linéaire. Cette équation a la forme suivante :
D.O=aC+b
(II .3)
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Le mode opératoire est comme suit : dans un flacon en polyéthylène contenant l’échantillon et
à l'aide d'un gaz vecteur (Argon) sous une pression de 2,8 bars, on amène le (NaB ).
L'hydrogène libéré, réduit les ions métalliques en hydrures volatiles dans une cellule en quartz
à partir de laquelle l'absorption du métal est mesurée.
• Flamme air acétylène : Concernant les métaux essentiels aux concentrations relativement
importantes (Zn), nous avons utilisé la méthode de flamme air acétylène. La surface de
l'échantillon est exposée au nébuliseur sous l’action d'un gaz. Celui-ci produit un aérosol qui
va être dissocié en atomes par une flamme qui absorbe la lumière émise sous forme de
radiation de chaque élément constituant la lampe.
• Four à graphite : Les éléments métalliques à concentrations relativement faibles sont
analysés à l'aide d'un four à graphite (Cd, Pb... etc). C'est un four en graphite de revêtement
pyrolytique interne. Le modèle utilisé est de type «HGA 500 » de Perkin Elmer. Le principe
repose sur la volatilisation des échantillons par atomisation dans un four suivant trois cycles
de montées de température. 10µl de chaque échantillon sont injectés automatiquement dans le
four. Après écoulement du temps de montées de température programmée, l'absorption
relative est enregistrée.
II.2.2.10. Etalonnage
L'étalonnage doit être réalisé très soigneusement, dans un domaine de concentration où
la loi de Béer Lambert est respectée (Tableau 2.2). La mesure de la concentration d'un
élément dans l'échantillon est déterminée à partir d'une courbe d'étalonnage. La gamme
d'étalonnage doit autant que possible être comprise autour de valeurs de l'échantillon analysé.
Les solutions étalons sont préparées à partir de solution mère qui a une concentration connue
en g/l de l'élément à doser. Les standards ne sont préparés qu'au moment de l'analyse.
Tableau 2.2. Concentration des solutions standards utilisées
Métaux
Concentration en µg / ml
S1
S2
S3
Hg
5
10
15
Zn
1000
2000
3000
II.2.2.11. Calcul des concentrations des métaux lourds
Pour obtenir les concentrations des métaux lourds étudiés, nous avons établi l'équation
droite d'étalonnage par régression linéaire. Cette équation a la forme suivante :
D.O=aC+b
(II .3)