Chapitre II
Matériel et méthodes
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
Lecture
Les colonies apparaîtront comme dans le cas de l’analyse de l’eau, c'est-à-dire rouges
bordeau, un test confirmatif sur bouillon Evalitsky sera nécessaire pour confirmer s’il s’agit de
streptocoques fécaux.
b. Recherche et dénombrement des staphylocoques
On procède de la même manière que précédemment en utilisant un milieu gélosé Baird Parker,
après incubation à 37°C pendant 24 -48heures. Les colonies suspectes apparaitront noires.
(Tableau I).
c. Recherche et dénombrement des Levures et Moisissures
A partir des dilutions préparées, Etaler 2 gouttes (100µl) sur une boite de Pétri contenant de
la gélose Sabouraud+ Chloramphénicol, à l’aide d’un râteau stérile, puis mettre les boites dans un
endroit propre à la température ambiante (28°C). La lecture se fait quotidiennement pendant 5 jours.
(Tableau II.1)
4.3.2.3. Recherche et dénombrement des anaérobies sulfitoréducteurs (ASR)
 Mode opératoire
 Prélever 1ml, à l’aide d’une pipette pasteur stérile, de chaque dilution dans un tube à essai
stérile et vide ;
 Mettre les échantillons dans un bain marie à 80°C pendant 10 minutes pour éliminer toutes
les formes végétatives;
 Refroidir immédiatement sous l'eau du robinet;
 Ajouter 19 ml de la gélose viande-foie additionnée à deux additifs (sulfites de sodium et
Alun de fer);
 Laisser solidifier puis incuber à 37°C pendant 24-48 heures
 Lecture : Dénombrer les colonies entourées d'un halo noir. Les résultats sont exprimés par
gramme de chair.(voir figure II.16).
4.3.2.3. Recherche des salmonelles
A partir des dilutions 10
-1 ensemencer 1ml dans un tube contenant 10ml de SFB et rajouter
deux disques de l’additif SFB pour la recherche des salmonelles. La suite de la manipulation est
analogue à celle effectuée pour l’eau. (Voir figure II.17).