Chapitre II
Matériel et méthodes
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b. Mode opératoire
 Stériliser le dispositif de filtration ;
 Mettre en place le dispositif ;
 Poser stérilement la membrane stérile ;
 filtrer un volume d’échantillon (100ml) ;
 Déposer le filtre sur le milieu adéquat, sans
faire de bulles d’air et sans la retourner;
 Inscrire sur la boite de Pétri, le numéro de
l’échantillon et la date ;
 Placer les boites de Pétri en position inverse
et les Incuber à une température adéquate ;
 Flamber l’ensemble godet-base pour une autre manipulation.
La composition des milieux de culture et des réactifs utilisés est consignée en annexe II.
4.3.1.1. Dénombrement des Coliformes, Streptocoques fécaux et des staphylocoques :
a. Dénombrement des Coliformes totaux et Coliformes thermotolérants «fécaux»
Cette méthode conduit à un dénombrement présomptif des coliformes totaux et des
coliformes fécaux sur un milieu gélosé lactosé (gélose au tergitol). Les boites destinées à la
recherche des coliformes totaux ont été incubées à 37°C pendant 24h à 48h, alors que celles
destinées à la recherche des coliformes fécaux ont été incubées à 44°C pendant 24h à 48h. (Figure
II.13). Le nombre de colonies trouvées sera exprimé en Unité Formante de Colonie dans 100 ml
d’eau analysée (UFC/100ml).
Figure II.12: Dispositif de filtration
Sur membrane.