CHAPITRE TROISIEME
CULTURE ALGALE
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Figure 14. Solutions utilisées pour la préparation de milieu de culture F/2 modifié.
La stérilisation des flacons contenant les solutions I, II et métallique (Fig.14) se fait à
l’autoclave. Cette étape permet de limiter l’entrée de contaminants pathogènes provenant du
milieu extérieur (virus, procaryotes, protozoaires). (Delvil, 2009).
Le milieu de culture F/2 préparé pour cette étude est un F/2 modifié du fait qu’il ne
contient pas la solution Molybdate de sodium dihydraté (Na 2 Mo 4 , 2H 2 O) et la solution
vitaminique. Ces dernières n’étaient pas disponibles. Il est réservé seulement pour le
repiquage des grands volumes.
2.2.3. Techniques de culture
Le mode de culture suivie est la culture en batch ; Un inoculum contenant des cellules
de phytoplancton à cultiver est injecté dans un récipient exposé à la lumière (ballon, bouteille,
bac, etc.) contenant tous les éléments nutritifs nécessaires à leur multiplication pour une
bonne croissance de la population phytoplanctonique. Il n’y a plus d’échanges d’éléments
nutritifs, ni de biomasse avec l’extérieur : le milieu est clos, on peut également appeler une
culture en batch une culture fermée (Herbland, 2007).
2.2.3.1.Maintenance des cultures souches et mères
Les souches sont connues sous le nom de stocks, des espèces sélectionnées représentent
la base de la culture algale. Ces cultures sont normalement maintenues dans des milieux de
culture spécifiques (le milieu F/2 ou sur des géloses d’agar à base d’eau de mer enrichie en
nutriment dans des tubes à essai inclinés ou dans des boites de pétrie) et dans des conditions
contrôlées de température et de lumière. Les cultures souches sont utilisées pour fournir des
cultures mères (appelées aussi inoculum) (Helm et al., 2006).
2.2.3.2.Ensemencement et repiquage de la culture
La souche de Nannocloropsis oculata est inoculée dans des tubes à essai contenant 10
ml d’eau de mer filtrée, stérilisée, enrichie. Les tubes sont fermés avec la parafilm.
F/2 modifié
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