Chapitre III
Matériel et méthodes
38
A = DO =log Io/I = .L.C
L’absorption et la transmission sont deux phénomènes auxquels est soumise une substance
d’épaisseur (L) traversée par un faisceau lumineux monochromatique. Les quantités de lumières
absorbées (Absorbance) et transmise (transmission) obéissent à la loi de Beer-Lambert.
Où : I 0 , I : est l’intensité lumineuse incidente et émergente du milieu absorbant.
A : est l’absorbance ou densité optique.
ε: est le coefficient d’extinction moléculaire.
L : est le trajet optique (épaisseur du milieu absorbant).
C : est la concentration du milieu absorbant.
3.3. Principe général
Le principe de dosage des sels nutritifs est basé sur une réaction de coloration. En effet ces sels
réagissent dans certaines conditions (T°C, pH, Catalyseur …) avec des réactifs spécifiques pour
donner naissance à une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d’ondes (λ).
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même cette dernière
est de temps plus important que la solution est concentrée en sel dosé.
Matériel utilisé
- Auto-Analyzer SAN plus System de marque SKALAR®, 1998.
- Bi-distillateur MILLI-Q® Reagent Water System.
- Des micropipettes Fortuna ® avec éjecteur d’embouts de type DIGITAL , une de 200 à 1000
μl et l’autre de 20 à 250 μl, ainsi que des fioles de 100 et 500 ml.
- Balance, Spatule, entonnoir, bécher et la hote.
3.4. Etalonnage
Cette opération nécessite la préparation pour chacun des éléments à analyser une solution mère
et une solution fille. Pour chacune de ces solutions filles, on réalise une série de six étalons couvrant
la gamme de la concentration des échantillons rencontrée habituellement dans l’eau de mer. Les
droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les concentrations
connus des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes. L’eau bi-distillée et les
réactifs sont pris comme référence pour la construction de ligne de base.
Matériel et méthodes
38
A = DO =log Io/I = .L.C
L’absorption et la transmission sont deux phénomènes auxquels est soumise une substance
d’épaisseur (L) traversée par un faisceau lumineux monochromatique. Les quantités de lumières
absorbées (Absorbance) et transmise (transmission) obéissent à la loi de Beer-Lambert.
Où : I 0 , I : est l’intensité lumineuse incidente et émergente du milieu absorbant.
A : est l’absorbance ou densité optique.
ε: est le coefficient d’extinction moléculaire.
L : est le trajet optique (épaisseur du milieu absorbant).
C : est la concentration du milieu absorbant.
3.3. Principe général
Le principe de dosage des sels nutritifs est basé sur une réaction de coloration. En effet ces sels
réagissent dans certaines conditions (T°C, pH, Catalyseur …) avec des réactifs spécifiques pour
donner naissance à une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d’ondes (λ).
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même cette dernière
est de temps plus important que la solution est concentrée en sel dosé.
Matériel utilisé
- Auto-Analyzer SAN plus System de marque SKALAR®, 1998.
- Bi-distillateur MILLI-Q® Reagent Water System.
- Des micropipettes Fortuna ® avec éjecteur d’embouts de type DIGITAL , une de 200 à 1000
μl et l’autre de 20 à 250 μl, ainsi que des fioles de 100 et 500 ml.
- Balance, Spatule, entonnoir, bécher et la hote.
3.4. Etalonnage
Cette opération nécessite la préparation pour chacun des éléments à analyser une solution mère
et une solution fille. Pour chacune de ces solutions filles, on réalise une série de six étalons couvrant
la gamme de la concentration des échantillons rencontrée habituellement dans l’eau de mer. Les
droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les concentrations
connus des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes. L’eau bi-distillée et les
réactifs sont pris comme référence pour la construction de ligne de base.