Chapitre III : Matériels et Méthodes
ϰϭϭ
Les méthodes spectroscopiques
• Absorbtion infrarouge
• Absorbtion ultraviolet
• Fluorescence ultraviolet
• RMN (résonnance magnétique nucléaire)
Les méthodes chromatographiques
• Chromatographie sur couche mince (CCM)
• Chromatographie en phase gazeuse
• Chromatographie liquide haute performance (CLHP)
Les méthodes couplées
• HPLC/SM
• CPG/SM (spectrométrie de masse)
• CPG/IRTF (infra rouge à transformée de Fourier)
Toutes ces méthodes nécessitent un traitement des échantillons qui doit comprendre les
étapes suivantes :
• Extraction des hydrocarbures par un ou plusieurs solvants organiques
(hexane, tétrachlorure de carbone, dichlorométhane…)
• Concentration des extraits et purification/fractionnement par
chromatographie sur colonne à adsorbants (florisil, gel de silice, alumine…)
• Analyse proprement dite
3.5. Traitement des échantillons
3.5.1. Hydrocarbures dissous/dispersés dans l’eau de mer
3.5.1.1. L’extraction des hydrocarbures (liquide liquide)
L’extraction proprement dite se fait au laboratoire. En ajoutant 50ml de hexane, on
procède à une agitation mécanique dans des ampoules à décanter, d’une durée de 15mn.
A la fin de chaque agitation on laisse décanter 15mn.
La phase organique, plus dense que l’eau, est récupérée dans un erlenmeyer à col rodé
(250ml). L’opération est répétée une seconde fois par addition de 50 ml d’hexane à
l’eau de mer ; la phase organique est rajoutée au premier extrait ; le volume de l’eau
extrait est alors mesuré dans une éprouvette graduée.
Quelque grammes de Sodium anhydre Na 2 SO 4 sont rajoutés à l’extrait afin d’éliminer
toute trace d’eau.
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Les méthodes spectroscopiques
• Absorbtion infrarouge
• Absorbtion ultraviolet
• Fluorescence ultraviolet
• RMN (résonnance magnétique nucléaire)
Les méthodes chromatographiques
• Chromatographie sur couche mince (CCM)
• Chromatographie en phase gazeuse
• Chromatographie liquide haute performance (CLHP)
Les méthodes couplées
• HPLC/SM
• CPG/SM (spectrométrie de masse)
• CPG/IRTF (infra rouge à transformée de Fourier)
Toutes ces méthodes nécessitent un traitement des échantillons qui doit comprendre les
étapes suivantes :
• Extraction des hydrocarbures par un ou plusieurs solvants organiques
(hexane, tétrachlorure de carbone, dichlorométhane…)
• Concentration des extraits et purification/fractionnement par
chromatographie sur colonne à adsorbants (florisil, gel de silice, alumine…)
• Analyse proprement dite
3.5. Traitement des échantillons
3.5.1. Hydrocarbures dissous/dispersés dans l’eau de mer
3.5.1.1. L’extraction des hydrocarbures (liquide liquide)
L’extraction proprement dite se fait au laboratoire. En ajoutant 50ml de hexane, on
procède à une agitation mécanique dans des ampoules à décanter, d’une durée de 15mn.
A la fin de chaque agitation on laisse décanter 15mn.
La phase organique, plus dense que l’eau, est récupérée dans un erlenmeyer à col rodé
(250ml). L’opération est répétée une seconde fois par addition de 50 ml d’hexane à
l’eau de mer ; la phase organique est rajoutée au premier extrait ; le volume de l’eau
extrait est alors mesuré dans une éprouvette graduée.
Quelque grammes de Sodium anhydre Na 2 SO 4 sont rajoutés à l’extrait afin d’éliminer
toute trace d’eau.