Chapitre Ш
Matériel et méthodes
53
Les colonies suspectes font l’objet de test de la catalase, le mode opératoire de ce test est
schématisé dans le tableau suivant :
Tableau.3 : Le mode opératoire de test de catalase.
Technique
Résultats
Aspect du test positif
 Sur une lame propre et
séchée déposer une
goutte d’eau oxygénée à
10 volumes.
 A l’aide d’une pipette
Pasteur., une colonie
bactérienne isolée est
déposée sur la lame.
 Observer immédiatement
 Apparition de bulles,
dégagement gazeux
de
dioxygène :
catalase (+)
 Pas
de
bulles :
catalase (-)
c- Test d’oxydase
C’est un test fondamental pour orienter l’identification des bacilles Gram-. Il met en
évidence la présence dans les bactéries d’une enzyme appelée «le cytochrome oxydase" qui
capable d’oxyder la forme réduite de dérivées "N-méthylés du paraphénylènediamine" en
semi-quinone caractérisé par une couleur rose violacée.
Ce test est réalisé à l’aide d’une plaque de marque « BD BBL Dryslide » contenant
quatre petits carrés pré-imprégné par une réactive et destiné chacun à tester une colonie
bactérienne.
- Ecraser, avec une effilure d’une pipette Pasteur, une colonie de germe à étudier sur le
petit carré. S’il y a apparition d’une tache violette au bout de 30 secondes, on pourra
conclure que la bactérie possède le cytochrome oxydase, dans le cas contraire la
bactérie est dite « oxydase –».
Oxydase +
Oxydase -