Troisième partie : Résultat et discussions
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10. Recherche et dénombrement des anaérobies sulfito-reducteurs (Norme
XP V 08-061) (Figure 09).
A. Mode opératoire :
placer la suspension mère et les dilutions dans un bain-Marie à 80°C pendant
10 minutes pour éliminer toutes les formes végétatives,
refroidir immédiatement les tubes sous l'eau de robinet (faisant un choc
thermique),
ajouter 15 ml de la gélose viande-foie en surfusion additionnée des additifs
sulfites de sodium et alun de fer (20 gouttes pour chacun des additifs),
laisser solidifier puis incuber à 37°C pour les sulfito-réducteurs et à 44
o
C pour
C. perfringens pendant 72h.
B. Lecture :
Rechercher les colonies noires. Ces dernières correspondent aux bactéries produisant à
partir des sulfites, des sulfures qui ont précipités avec les ions de fer III.
11. Recherche et du dénombrement de Staphylococcus aureus
(Norme ISO6888 NA 15164) (Figure 10):
A. Mode opératoire :
La recherche de Staphylococcus aureus se fait sur la gélose de Baird-Parker au jaune
d'œuf et au tellurite de potassium (ou milieu Chapman). Le milieu est ensemencé en surface
avec 0,1 ml de la suspension mère et les dilutions. L'inoculum est ensuite étalé à l'aide d'un
râteau en verre. L'incubation se fait à 37
o
C pendant 48h.
B. Lecture :
Les colonies de Staphylococcus aureus apparaissent sur le milieu Baird-Parker, noires
(réduction du tellurite en tellure), bombées, rondes et entourées d'un halo d'éclaircissement dû
à la protéolyse des protéines du jaune d’œuf et, éventuellement, un liseré blanc opaque
(précipitation des acides gras produits par la lécithinase qui hydrolyse la lécithine du jaune
d’œuf). Elles sont jaunes dorées (mannitol+), lisses sur le milieu Chapman.
C. Confirmation :
Les colonies noires suspectées, entourées d’un halo clair doivent subir des tests de
confirmation qui consistent en :
une coloration de Gram (Gram+),
un test de la catalase (catalase +),
un test d’oxydase (oxydase+),
un test de la coagulase (coagulase+).
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10. Recherche et dénombrement des anaérobies sulfito-reducteurs (Norme
XP V 08-061) (Figure 09).
A. Mode opératoire :
placer la suspension mère et les dilutions dans un bain-Marie à 80°C pendant
10 minutes pour éliminer toutes les formes végétatives,
refroidir immédiatement les tubes sous l'eau de robinet (faisant un choc
thermique),
ajouter 15 ml de la gélose viande-foie en surfusion additionnée des additifs
sulfites de sodium et alun de fer (20 gouttes pour chacun des additifs),
laisser solidifier puis incuber à 37°C pour les sulfito-réducteurs et à 44
o
C pour
C. perfringens pendant 72h.
B. Lecture :
Rechercher les colonies noires. Ces dernières correspondent aux bactéries produisant à
partir des sulfites, des sulfures qui ont précipités avec les ions de fer III.
11. Recherche et du dénombrement de Staphylococcus aureus
(Norme ISO6888 NA 15164) (Figure 10):
A. Mode opératoire :
La recherche de Staphylococcus aureus se fait sur la gélose de Baird-Parker au jaune
d'œuf et au tellurite de potassium (ou milieu Chapman). Le milieu est ensemencé en surface
avec 0,1 ml de la suspension mère et les dilutions. L'inoculum est ensuite étalé à l'aide d'un
râteau en verre. L'incubation se fait à 37
o
C pendant 48h.
B. Lecture :
Les colonies de Staphylococcus aureus apparaissent sur le milieu Baird-Parker, noires
(réduction du tellurite en tellure), bombées, rondes et entourées d'un halo d'éclaircissement dû
à la protéolyse des protéines du jaune d’œuf et, éventuellement, un liseré blanc opaque
(précipitation des acides gras produits par la lécithinase qui hydrolyse la lécithine du jaune
d’œuf). Elles sont jaunes dorées (mannitol+), lisses sur le milieu Chapman.
C. Confirmation :
Les colonies noires suspectées, entourées d’un halo clair doivent subir des tests de
confirmation qui consistent en :
une coloration de Gram (Gram+),
un test de la catalase (catalase +),
un test d’oxydase (oxydase+),
un test de la coagulase (coagulase+).