Deuxième partie : Matériel et méthodes
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1. Cadre de l’étude :
Cette étude s’est déroulée du 11 avril au 06 juin 2013 au niveau de laboratoire de
microbiologie de l’ENSSMAL.
2. Echantillons :
Notre étude a porté sur trois échantillons de filets congelés de Panga. Ces derniers ont
été achetés dans des différents points de vente chez les détaillants commercialisant les
produits congelés (viandes, légumes et poissons). Le premier acheté à Dely Brahim, il
pèse 1000g, le deuxième acheté à El-Biar, il pèse 500g alors que le troisième a été
acheté à Cheragua et il a un poids de 500g.
Les échantillons sont transportés au laboratoire dans des sachets de stockage et à
température ambiante.
La décongélation se fait lentement à 4
o
C au réfrigérateur.
3. Préparation de la suspension mère et les dilutions :
 faire sortir les filets de Panga dans leur emballage aseptiquement devant un bec
bunsen et les poser sur un plateau stérile,
 prélever et peser 25 g de la chair après décongélation à l’aide d’un scalpel et
une pince stérile (la pesé se fait avec une balance (OHAUS
®
) de précision
0.01g),
 broyer la chair à l’aide d’un robot mixeur (WARING Commercial
®
) stérile en
ajoutant le diluant choisi jusqu’à l’obtention d’un mélange homogène ainsi on
obtient la suspension mère ou la dilution 10
-1
(BARTHE et al, 2007).
a) Préparation des dilutions :
 prendre 3 tubes stériles numérotés de 1 à 3 contenant chacun 9 ml de diluant
approprié,
 prélever 1ml de la suspension mère à l’aide d’une micropipette et l’introduire
dans 9 ml de diluant (tube N
o
1) et agiter vigoureusement à l’aide d’un vortex,
on obtient la dilution 10
-2
,
 on opère de la même manière jusqu’à l’obtention de la dilution 10
-4
(BARTHE
et al, 2007).