Chapitre 3
Matériels et Méthodes
42
Ø La lecture de l’intensité fluorescente se fait aux longueurs d’ondes suivantes :
· Longueur d’émission = 660 nm.
· Longueur d’excitation = 540 nm.
d. Etalonnage
L’étalonnage est réalisé à l’aide d’une série de quatre standards de concentration de : 2
µg/l, 4 µg/l, 6 µg/l, 8 µg/l et 10 µg/l, en plus d’un blanc de méthanol pour tracer une droite
d’étalonnage de la chlorophylle a.
Ces standards sont préparés à partir d’une solution mère de chlorophylle de 2 mg/l.
Les volumes à prélever de la solution mère pour la préparation de la gamme des standards
sont respectivement : 20 µl, 30 µl, 40 µl et 50µl à compléter ce volume à 10ml avec du
méthanol à 96%.
Tableau 3.1: concentration des standards et leur intensité
fluorescente
IF(UA)
concentration
(µg/l)
méthanol
0
0
STD1
1,2
4
STD2
1,6
6
STD3
2
8
STD4
2,4
10
Figure 3.15 : Courbe d’étalonnage de la chlorophylle a.
y = 0,174x
R² = 0,992
0
0,5
1
1,5
2
0
5
10
15
IF
[STD]