Chapitre 3
Matériels et Méthodes
41
a. Matériel et appareillage
Ø Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,7 µm de porosité.
Ø Tubes de dosage de 10ml, et des tubes de 10ml pour la préparation des standards.
Ø Centrifugeuse Hettich ZENTRIFUGEN de type EBA 30 (Figure 3.13, annexe2).
Ø Spectrophotomètre fluorescence de type HITACHI modèle 650-10 S équipé d’une
lampe « Xénon » qui est la source du rayonnement UV et une cuvette en quartz de 1
cm de trajet optique (Figure 3.14, annexe2).
Ø Matériels courant de laboratoire.
b. Réactifs
· Suspension carbonate de magnésium MgCO 3 à 1%.
· Solvant d’extraction : méthanol à 96%.
c. Mode opératoire
Filtration et conservation
Ø Dès le retour au laboratoire on a fait la filtration de chaque échantillon et on ajoute
quelques gouttes de MgCO 3 sur le filtre.
Ø Le filtre est plié en quatre et enrobé dans du papier aluminium préalablement étiqueté.
Ø Mettre les filtres dans le congélateur pour une analyse ultérieure.
Extraction au méthanol
Ø Les tubes de 10 ml sont préalablement rincés avec de détergent, de l’eau de robinet et
de l’eau distillée, et sécher à l’étuve.
Ø Allumer l’appareil et la lampe une heure avant les mesures.
Ø Préparation d’une solution de méthanol à 96% : dans une éprouvette de 100 ml remplir
96,2 ml de méthanol pur et compléter à 100 ml par de l’eau distillée.
Ø Conditionner les tubes de dosage par le méthanol.
Ø Mettre les filtres dans les tubes préalablement numérotés et ajouter 5 ml de méthanol à
96%.
Ø Placer les tubes à l’obscurité dans un réfrigérateur, pour une période d’extraction de 30
minutes.
Ø Après l’extraction, centrifuger à 3000 tours/min, pendant 2 minutes.
Ø mesurer l’intensité fluorescente (IF) des échantillons.
Matériels et Méthodes
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a. Matériel et appareillage
Ø Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,7 µm de porosité.
Ø Tubes de dosage de 10ml, et des tubes de 10ml pour la préparation des standards.
Ø Centrifugeuse Hettich ZENTRIFUGEN de type EBA 30 (Figure 3.13, annexe2).
Ø Spectrophotomètre fluorescence de type HITACHI modèle 650-10 S équipé d’une
lampe « Xénon » qui est la source du rayonnement UV et une cuvette en quartz de 1
cm de trajet optique (Figure 3.14, annexe2).
Ø Matériels courant de laboratoire.
b. Réactifs
· Suspension carbonate de magnésium MgCO 3 à 1%.
· Solvant d’extraction : méthanol à 96%.
c. Mode opératoire
Filtration et conservation
Ø Dès le retour au laboratoire on a fait la filtration de chaque échantillon et on ajoute
quelques gouttes de MgCO 3 sur le filtre.
Ø Le filtre est plié en quatre et enrobé dans du papier aluminium préalablement étiqueté.
Ø Mettre les filtres dans le congélateur pour une analyse ultérieure.
Extraction au méthanol
Ø Les tubes de 10 ml sont préalablement rincés avec de détergent, de l’eau de robinet et
de l’eau distillée, et sécher à l’étuve.
Ø Allumer l’appareil et la lampe une heure avant les mesures.
Ø Préparation d’une solution de méthanol à 96% : dans une éprouvette de 100 ml remplir
96,2 ml de méthanol pur et compléter à 100 ml par de l’eau distillée.
Ø Conditionner les tubes de dosage par le méthanol.
Ø Mettre les filtres dans les tubes préalablement numérotés et ajouter 5 ml de méthanol à
96%.
Ø Placer les tubes à l’obscurité dans un réfrigérateur, pour une période d’extraction de 30
minutes.
Ø Après l’extraction, centrifuger à 3000 tours/min, pendant 2 minutes.
Ø mesurer l’intensité fluorescente (IF) des échantillons.