ANNEXE I
Dosage des sels nutritifs
Dosage des nitrates et nitrites :
1-Réactifs :
1-1 Réactif 1 : solution de Sulfanilamine
Pour préparer 500ml de réactif :
o diluer 50ml d’acide chlorhydrique concentré (d=1.18) dans environ 300ml d’eau
distillée ou déminéralisée.
o dissoudre 5g de Sulfanilamide dans cette solution et compléter à 500ml.
Cette solution est stable indéfiniment.
1-2 Réactif 2 : Solution de N-naphtylenediamine :
o Dans 500 ml d’eau distillée, dissoudre 0.5g de dichlorhydrate de N-(1-naphtyl)éthylénediamine.
o conserver cette solution au froid et à l’abri de la lumière.
1-3 Solution étalon primaire de nitrite :
o Sécher à 110 °C pendant plusieurs heures du nitrite de sodium anhydre NaNO 2 de pureté
garantie. Grasshoff (1976) recommande de ne pas utiliser de produit trop ancien.
o Dissoudre 0.345g dans l’eau distillée, compléter à 100ml et ajouter 1ml de
chloroforme. Transférer la solution dans un flacon en verre brun.1ml contient 5 µmol
de N-NO 2
-
.
Conserver au froid et à l’abri de la lumière. Cette solution est stable de 1à 2 mois.
1-4 Solution étalon secondaire de nitrite:
o Diluer 100 fois la solution étalon primaire pour obtenir la solution secondaire : 1ml
contient 0.05µmol de N-NO 2
-
.
Cette solution doit être préparée extemporanément : elle ne se conserve que quelques heures.
1-5 Solution étalon primaire de nitrate:
Même solution que pour l’analyse des ions nitrites.
1-6 Solution étalon secondaire de nitrate:
o
Dissoudre 0.506g de nitrate de potassium anhydre dans 1l d’eau distillée, ajouter 1ml
de chloroforme : 1ml contient 5µmol de N-NO 3
-
La solution est stable plusieurs mois si elle est conservée au froid et à l’abri de la lumière.
1-7 Solution concentrée de chlorure d’ammonium:
o Préparer une solution à 250g de chlorure d’ammonium NH 4 CL par litre dans l’eau
distillée.
1-8 Solution diluée de chlorure d’ammonium:
o Diluer 40fois la solution précédente avec de l’eau distillée (25ml pour 1l de solution).
1-9 Solution de sulfate de cuivre:
o Dans 500ml d’eau distillée, dissoudre 10g de sulfate de cuivre pentahydraté (CuSO 4 ,
5H 2 O).
1-10 Colonne réductrice :
De cette colonne dépend la validité des résultats, aussi doit-elle être préparée et entretenue
avec le plus grand soin.
Préparation du cadmium :
Tamiser du cadmium en grains pour en garder la fraction comprise entre 0.5 et 2mm.
Laver environ 50g de grains à l’acide chlorhydrique 2mol/l puis rincer à l’eau distillée.
Laver rapidement par l’acide nitrique 0.3mol/l puis rincer à l’eau distillée.
Rincer le cadmium avec du Diethyl-Ether (C 2 H 5 OC 2 H 5 ).
Laver à nouveau par l’acide chlorhydrique 2mol/l pour chasser les ions NO 3
- et rincer
abondamment à l’eau distillée.
Dosage des sels nutritifs
Dosage des nitrates et nitrites :
1-Réactifs :
1-1 Réactif 1 : solution de Sulfanilamine
Pour préparer 500ml de réactif :
o diluer 50ml d’acide chlorhydrique concentré (d=1.18) dans environ 300ml d’eau
distillée ou déminéralisée.
o dissoudre 5g de Sulfanilamide dans cette solution et compléter à 500ml.
Cette solution est stable indéfiniment.
1-2 Réactif 2 : Solution de N-naphtylenediamine :
o Dans 500 ml d’eau distillée, dissoudre 0.5g de dichlorhydrate de N-(1-naphtyl)éthylénediamine.
o conserver cette solution au froid et à l’abri de la lumière.
1-3 Solution étalon primaire de nitrite :
o Sécher à 110 °C pendant plusieurs heures du nitrite de sodium anhydre NaNO 2 de pureté
garantie. Grasshoff (1976) recommande de ne pas utiliser de produit trop ancien.
o Dissoudre 0.345g dans l’eau distillée, compléter à 100ml et ajouter 1ml de
chloroforme. Transférer la solution dans un flacon en verre brun.1ml contient 5 µmol
de N-NO 2
-
.
Conserver au froid et à l’abri de la lumière. Cette solution est stable de 1à 2 mois.
1-4 Solution étalon secondaire de nitrite:
o Diluer 100 fois la solution étalon primaire pour obtenir la solution secondaire : 1ml
contient 0.05µmol de N-NO 2
-
.
Cette solution doit être préparée extemporanément : elle ne se conserve que quelques heures.
1-5 Solution étalon primaire de nitrate:
Même solution que pour l’analyse des ions nitrites.
1-6 Solution étalon secondaire de nitrate:
o
Dissoudre 0.506g de nitrate de potassium anhydre dans 1l d’eau distillée, ajouter 1ml
de chloroforme : 1ml contient 5µmol de N-NO 3
-
La solution est stable plusieurs mois si elle est conservée au froid et à l’abri de la lumière.
1-7 Solution concentrée de chlorure d’ammonium:
o Préparer une solution à 250g de chlorure d’ammonium NH 4 CL par litre dans l’eau
distillée.
1-8 Solution diluée de chlorure d’ammonium:
o Diluer 40fois la solution précédente avec de l’eau distillée (25ml pour 1l de solution).
1-9 Solution de sulfate de cuivre:
o Dans 500ml d’eau distillée, dissoudre 10g de sulfate de cuivre pentahydraté (CuSO 4 ,
5H 2 O).
1-10 Colonne réductrice :
De cette colonne dépend la validité des résultats, aussi doit-elle être préparée et entretenue
avec le plus grand soin.
Préparation du cadmium :
Tamiser du cadmium en grains pour en garder la fraction comprise entre 0.5 et 2mm.
Laver environ 50g de grains à l’acide chlorhydrique 2mol/l puis rincer à l’eau distillée.
Laver rapidement par l’acide nitrique 0.3mol/l puis rincer à l’eau distillée.
Rincer le cadmium avec du Diethyl-Ether (C 2 H 5 OC 2 H 5 ).
Laver à nouveau par l’acide chlorhydrique 2mol/l pour chasser les ions NO 3
- et rincer
abondamment à l’eau distillée.