Chapitre II
Matériels et méthodes.
26
III.1.Définition du spectrophotomètre
Un spectrophotomètre (figure 06) est un appareil capable de mesurer l'absorbance A d'une
substance colorée en solution pour une longueur d'onde donnée λo. Il est constitué d’une
source de lumière blanche, d’un système dispersif (réseau ou prisme) muni d'une fente
capable de sélectionner une lumière monochromatique incidente tombant sur une cuve
porte échantillon pouvant contenir une substance colorée d’étude S ou une solution de
référence E, solution incolore obtenue en privant la solution S de l’espèce colorée d’un
système optoélectronique permettant de calculer la valeur de A à l’aide de mesures de
puissances lumineuses.
III.2.Principe d’utilisation du spectrophotomètre
Le principe de l’utilisation de la spectrophotométrie pour l’analyse quantitative est basé sur
le fait que l’intensité d’absorption (ou d’émission) est fonction de la concentration de la
particule qui absorbe (ou qui émet) de la lumière.
Lorsque d’une lumière monochromatique d’intensité I o traverse un milieu homogène
(figure 07), l’intensité de la lumière émergente I décroît selon une fonction exponentielle
lorsque l’épaisseur l du milieu absorbant augmente. Si on étudie principalement des
solutions, la loi de Beer fait intervenir les concentrations et s’exprime sous la forme (06):
………………..(06)
Figure 06 : Spectrophotomètre.
A = D.O = Ln (I 0 /I) = ε.L.C
Chapitre II
Matériels et méthodes.
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III.1.Définition du spectrophotomètre
Un spectrophotomètre (figure 06) est un appareil capable de mesurer l'absorbance A d'une
substance colorée en solution pour une longueur d'onde donnée λo. Il est constitué d’une
source de lumière blanche, d’un système dispersif (réseau ou prisme) muni d'une fente
capable de sélectionner une lumière monochromatique incidente tombant sur une cuve
porte échantillon pouvant contenir une substance colorée d’étude S ou une solution de
référence E, solution incolore obtenue en privant la solution S de l’espèce colorée d’un
système optoélectronique permettant de calculer la valeur de A à l’aide de mesures de
puissances lumineuses.
III.2.Principe d’utilisation du spectrophotomètre
Le principe de l’utilisation de la spectrophotométrie pour l’analyse quantitative est basé sur
le fait que l’intensité d’absorption (ou d’émission) est fonction de la concentration de la
particule qui absorbe (ou qui émet) de la lumière.
Lorsque d’une lumière monochromatique d’intensité I o traverse un milieu homogène
(figure 07), l’intensité de la lumière émergente I décroît selon une fonction exponentielle
lorsque l’épaisseur l du milieu absorbant augmente. Si on étudie principalement des
solutions, la loi de Beer fait intervenir les concentrations et s’exprime sous la forme (06):
………………..(06)
Figure 06 : Spectrophotomètre.
A = D.O = Ln (I 0 /I) = ε.L.C
Chapitre II
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III.1.Définition du spectrophotomètre
Un spectrophotomètre (figure 06) est un appareil capable de mesurer l'absorbance A d'une
substance colorée en solution pour une longueur d'onde donnée λo. Il est constitué d’une
source de lumière blanche, d’un système dispersif (réseau ou prisme) muni d'une fente
capable de sélectionner une lumière monochromatique incidente tombant sur une cuve
porte échantillon pouvant contenir une substance colorée d’étude S ou une solution de
référence E, solution incolore obtenue en privant la solution S de l’espèce colorée d’un
système optoélectronique permettant de calculer la valeur de A à l’aide de mesures de
puissances lumineuses.
III.2.Principe d’utilisation du spectrophotomètre
Le principe de l’utilisation de la spectrophotométrie pour l’analyse quantitative est basé sur
le fait que l’intensité d’absorption (ou d’émission) est fonction de la concentration de la
particule qui absorbe (ou qui émet) de la lumière.
Lorsque d’une lumière monochromatique d’intensité I o traverse un milieu homogène
(figure 07), l’intensité de la lumière émergente I décroît selon une fonction exponentielle
lorsque l’épaisseur l du milieu absorbant augmente. Si on étudie principalement des
solutions, la loi de Beer fait intervenir les concentrations et s’exprime sous la forme (06):
………………..(06)
Figure 06 : Spectrophotomètre.
A = D.O = Ln (I 0 /I) = ε.L.C