Chapitre III
Matériel et méthodes
39
un évaporateur rotatif BUCHI R110 muni d'un thermostat. Ce dispositif est raccordé à une
pompe à vide travaillant à 1,3 millibar.
Figure 19: évaporateur rotatif.
Purification et fractionnemnt
Le solvant organique utilisé piège non seulement les hydrocarbures mais aussi tous les
composés organiques polaires tels que les lipides et les acides gras. Afin d’éliminer ces
derniers et d’isoler les hydrocarbures, une purification est réalisée par le biais d’une
chromatographie sur colonne ouverte.
Cette méthode utilise la chromatographie sur colonne ouverte remplie d’alumine neutre
(pouvoir de purification) et de gel de silice (pouvoir séparateur et/ou rôle de fractionnement)
conditionnés. Ces deux composés (70-230 mesch) sont agencés en deux lits successifs :
Préparation de la colonne : une burette de 50 ml de contenance, de 10 mm de diamètre interne
et munie d’un robinet en téflon ou en verre non-lubrifié est remplie, selon la méthode humide,
successivement par :
La laine de verre
20ml d’hexane
5g de gel de silice (70-230 mesh ASTM),
10g d’alumine (730 mesh)
Pincée de NaSO4 en tête de colonne
Elution de l’extrait : l’extrait (2 ml d’hexane) est déposé en tête de colonne.
La première fraction, composée d’hydrocarbures aliphatiques, est éluée par 20ml
d’hexane : c’est la fraction F1
Matériel et méthodes
39
un évaporateur rotatif BUCHI R110 muni d'un thermostat. Ce dispositif est raccordé à une
pompe à vide travaillant à 1,3 millibar.
Figure 19: évaporateur rotatif.
Purification et fractionnemnt
Le solvant organique utilisé piège non seulement les hydrocarbures mais aussi tous les
composés organiques polaires tels que les lipides et les acides gras. Afin d’éliminer ces
derniers et d’isoler les hydrocarbures, une purification est réalisée par le biais d’une
chromatographie sur colonne ouverte.
Cette méthode utilise la chromatographie sur colonne ouverte remplie d’alumine neutre
(pouvoir de purification) et de gel de silice (pouvoir séparateur et/ou rôle de fractionnement)
conditionnés. Ces deux composés (70-230 mesch) sont agencés en deux lits successifs :
Préparation de la colonne : une burette de 50 ml de contenance, de 10 mm de diamètre interne
et munie d’un robinet en téflon ou en verre non-lubrifié est remplie, selon la méthode humide,
successivement par :
La laine de verre
20ml d’hexane
5g de gel de silice (70-230 mesh ASTM),
10g d’alumine (730 mesh)
Pincée de NaSO4 en tête de colonne
Elution de l’extrait : l’extrait (2 ml d’hexane) est déposé en tête de colonne.
La première fraction, composée d’hydrocarbures aliphatiques, est éluée par 20ml
d’hexane : c’est la fraction F1