Chapitre II
Matériel et méthodes
17
Ce composé, en présence de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu oxydant) provoquera la
formation du bleu d’indophénol. La réaction est catalysée par le nitroprussiate de sodium. Le
maximum d’absorption se fait sur une longueur d’onde de 630 nm.
B. Dosage des nitrites
Les nitrites (NO 2
-
) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide (pH <
2). Ce composé formera en présence de N-naphtylethylènediamine un composé azoïque de
couleur rose absorbant la lumière à 540 nm (Benschneider & Robinson, 1952) et (Skalar, 2000).
C. Dosage des nitrates
Le dosage est basé sur la méthode de réduction des nitrates (NO 3
-
) en nitrites (NO 2
-
) en passant
l’échantillon par une colonne de cadmium traité au cuivre ( Wood et al.,1967).
Les nitrites (NO 2
- + NO 3
- réduits) seront après mesurés par colométrie (méthode décrite
auparavant). Il faudra ensuite déduire la concentration des nitrites déterminée directement
(dosages des nitrites) pour obtenir les concentrations des nitrates (Rodier et al., 1996).
D. Dosage des orthophosphates
Les ions orthophosphates (PO 4
3) réagissent avec le molybdate d’ammonium en présence
d’antimoine tartrate de potassium à une température de 40°C (bain marie) pour former un
complexe antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique (Murphy & Riley,
1962). La forme réduite de coloration bleue a un maximum d’absorption à 880nm.
E. Dosage des silicates
Le silicium dissous (représenté dans l’eau par 95% sous forme d’acide orthosilicique Si(OH) 4
selon (Aminot & Chaussepied, 1983) réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu acide
pour former un complexe silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un composé
coloré en bleu absorbant à 810 nm (Mullin & Riley, 1955).
On ajoute l’acide oxalique pour éviter les interférences des phosphates.
II.4 Etude des populations phytoplanctoniques
Par définition, les conservateurs sont toxiques. Leur addition entraine la mort d’organismes
vivants, précédée d’une forte irritation chimique (Grossel et al., 2006).
Selon le même auteur des organismes dépourvus de paroi cellulaire résistante peuvent éclater
avant la fin de conservation. Pour réduire cet effet il est important que l’agent de conservation
pénètre rapidement dans la cellule (McCully et al., 1980 in Grossel et al., 2006).
Matériel et méthodes
17
Ce composé, en présence de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu oxydant) provoquera la
formation du bleu d’indophénol. La réaction est catalysée par le nitroprussiate de sodium. Le
maximum d’absorption se fait sur une longueur d’onde de 630 nm.
B. Dosage des nitrites
Les nitrites (NO 2
-
) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide (pH <
2). Ce composé formera en présence de N-naphtylethylènediamine un composé azoïque de
couleur rose absorbant la lumière à 540 nm (Benschneider & Robinson, 1952) et (Skalar, 2000).
C. Dosage des nitrates
Le dosage est basé sur la méthode de réduction des nitrates (NO 3
-
) en nitrites (NO 2
-
) en passant
l’échantillon par une colonne de cadmium traité au cuivre ( Wood et al.,1967).
Les nitrites (NO 2
- + NO 3
- réduits) seront après mesurés par colométrie (méthode décrite
auparavant). Il faudra ensuite déduire la concentration des nitrites déterminée directement
(dosages des nitrites) pour obtenir les concentrations des nitrates (Rodier et al., 1996).
D. Dosage des orthophosphates
Les ions orthophosphates (PO 4
3) réagissent avec le molybdate d’ammonium en présence
d’antimoine tartrate de potassium à une température de 40°C (bain marie) pour former un
complexe antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique (Murphy & Riley,
1962). La forme réduite de coloration bleue a un maximum d’absorption à 880nm.
E. Dosage des silicates
Le silicium dissous (représenté dans l’eau par 95% sous forme d’acide orthosilicique Si(OH) 4
selon (Aminot & Chaussepied, 1983) réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu acide
pour former un complexe silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un composé
coloré en bleu absorbant à 810 nm (Mullin & Riley, 1955).
On ajoute l’acide oxalique pour éviter les interférences des phosphates.
II.4 Etude des populations phytoplanctoniques
Par définition, les conservateurs sont toxiques. Leur addition entraine la mort d’organismes
vivants, précédée d’une forte irritation chimique (Grossel et al., 2006).
Selon le même auteur des organismes dépourvus de paroi cellulaire résistante peuvent éclater
avant la fin de conservation. Pour réduire cet effet il est important que l’agent de conservation
pénètre rapidement dans la cellule (McCully et al., 1980 in Grossel et al., 2006).