CHAPITRE II
Matériel et méthodes
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Figure 5: Four à moufle avec creusets.
II.3.2. Etudes bactériologiques :
Les germes test recherchés sont les coliformes thermotolerants, E.coli, coliformes totaux,
streptocoques du groupe D, les staphylocoques, les Clostridium, les vibrions et les salmonelles.
II.3.2.1. Prélèvement :
Un examen bactériologique doit être effectué sur un échantillon correctement prélevé,
dans des flacons stérile, selon un mode opératoire précis évitant toute contamination
accidentelle, correctement transporté au laboratoire et analysé après une courte durée de
conservation dans des conditions satisfaisantes (MAUL et al, 1989).
 Les échantillons sont prélevés dans des flacons en verre de 500 ml, stérilisés au four à
170°C pendant 10 minutes.
 Les flacons sont ouverts, remplis et refermés sous l’eau pour éviter toute contamination
avec l’air (il est conseillé de ne pas remplir entièrement la bouteille et de laisser un
espace vide suffisant pour l’homogénéisation).
 Les échantillons sont transportés dans une glacière (4°C) à l’abri de la lumière.
 Pour éviter les modifications de la teneur initiale, l’analyse ne doit pas excéder 24 heures.
II.3.2.2. Méthodes de dénombrement :
Dans cette étude on a opté pour la méthode de dénombrement : La méthode de filtration
sur membrane (MF) afin d’avoir une estimation plus exacte sur la charge bactérienne dans la
zone d’étude.