Chapitre troisième
Matériel et méthodes
Evaluation de la contamination par les hydrocarbures
dans l’eau et le sédiment superficiel dans le port
d’Alger : cartographie des polluants
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3.3.3.4. Purification et fractionnement
La purification est réalisée en même temps que le fractionnement. Cette
opération par chromatographie liquide sur colonne ouverte permet d'éliminer les
composés polaires (lipides) mais aussi toute autre impureté. Elle permet aussi la
division de 1'échantillon extrait (soluté) en deux fractions:
 F1 pour les hydrocarbures aliphatiques ;
 F2 pour les hydrocarbures aromatiques.
Pour cela, une colonne chromatographique en verre, de contenance de 30
ml, ayant un diamètre interne de 10 mm, préalablement nettoyée à l'hexane est
remplie dans l'ordre suivant:
 un tampon de coton de verre ;
 5 g d'alumine (A1 2 0 3 ) : 70-230 MESH ASTM ;
 5 g de gel de silice : 70-230 MESH ASTM ;
 1 g de sulfate de sodium (Na 2 SO 4 ).
Les agents adsorbants préconisés pour la purification sont : 1'alumine et le gel de
silice. Ces produits ont été activés à 120°C pendant une nuit puis désactivés par
addition de 5 % du poids des adsorbants en eau bidistillée avant utilisation.
Opération d'élution :
 Verser le soluté (l'échantillon extrait) dans la colonne ;
 Opérer une élution avec 20 ml d'hexane et récupérer la fraction
aliphatique (Fl) ;
 Opérer une deuxième élution avec 30 ml d'un mélange
d'hexane/dichlorométhane aux proportions (70/30, VIV) et récupérer la
fraction aromatique (F2).
Stocker les fractions ainsi obtenues, dans le réfrigérateur, jusqu
'
à l'analyse.