Chapitre I
Matériel et méthodes
15
Attendre au moins 10 minutes mais pas plus de 2 heures.
Mesuré l absorbance en cuve de 1cm de trajet optique à la longueur d onde de 543µm
Mesurer le blanc de cuve (eau distillée), le blanc de réactif (réactif 1+2) et le blanc de
l échantillon (eau de mer).
Préparation de la gamme étalon
Introduire dans des fioles jaugées de 500ml de 1-2-5-10-20-50-100-250ml la solution
secondaire de nitrite déluée à 50µmol/l et compléter avec de l eau de mer afin d obtenir la
gamme de concentration de 0.1-0.2-0.5-1-2-5-10-25µmol/l
Analyser à 543µm les différentes solutions, ainsi que l eau brute ayant servi à préparer la
gamme étalon, puis tracer la courbe d étalonnage. (Figure 1.13)
c. les nitrates (NO 3
- )
Protocole de dosage
Principe
Le principe de base adopté par las analystes marins repose sur la réduction quasi
quantitative (>95%) du nitrate (NO 3
-
) en nitrites (NO 2
- ). Après réduction, on mesure en
réalité la somme de concentration en nitrite. [AMINOT et KEROUEL ,2004].
La réduction a été réalisée sur la colonne droite de Cadmium dopée avant son
utilisation et réactivée avant chaque analyse.
Préparation de la colonne réductrice de Cadmium
Le grain de Cadmium utilisé est d environ 0.5 à 2mm de diamètre, la préparation est
réalisée comme suit :
Laver le Cadmium avec de l acide chlorhydrique 2mol/l puis rincer à l eau
distillée.
Laver directement avec de l acide nitrique 0.3mol/l puis passer à l eau distillée.
Laver une deuxième fois avec de l acide chlorhydrique 2mol/l pour éliminer le
nitrate résiduel puis rincer abondamment à l eau distillée.
Vider au maximum la colonne sans la laisser à l air libre et ajouter au attendre la
solution du sulfate de cuivre et laisser en contacte plusieurs minutes.
Laver abondamment la colonne avec de l eau déminéralisée.
Laver et remplir la colonne avec la solution tampon et laisser la pendant 24 à 48
heurs.
L activation de la réduction du réducteur est réalisée par le passage sur la colonne,
de 500ml de solution tampon à laquelle nous avons rajoutés 10ml d étalon de
nitrate à 5000µmol/l, puis rinçage de la colonne impérativement avec la solution
tampon (préparation de la solution tampon : dans 500ml d'eau distillée ajouter
10ml de solution de chlorure d'ammonium puis 10ml de solution d'hydroxyde de
sodium et mélanger).
Matériel et méthodes
15
Attendre au moins 10 minutes mais pas plus de 2 heures.
Mesuré l absorbance en cuve de 1cm de trajet optique à la longueur d onde de 543µm
Mesurer le blanc de cuve (eau distillée), le blanc de réactif (réactif 1+2) et le blanc de
l échantillon (eau de mer).
Préparation de la gamme étalon
Introduire dans des fioles jaugées de 500ml de 1-2-5-10-20-50-100-250ml la solution
secondaire de nitrite déluée à 50µmol/l et compléter avec de l eau de mer afin d obtenir la
gamme de concentration de 0.1-0.2-0.5-1-2-5-10-25µmol/l
Analyser à 543µm les différentes solutions, ainsi que l eau brute ayant servi à préparer la
gamme étalon, puis tracer la courbe d étalonnage. (Figure 1.13)
c. les nitrates (NO 3
- )
Protocole de dosage
Principe
Le principe de base adopté par las analystes marins repose sur la réduction quasi
quantitative (>95%) du nitrate (NO 3
-
) en nitrites (NO 2
- ). Après réduction, on mesure en
réalité la somme de concentration en nitrite. [AMINOT et KEROUEL ,2004].
La réduction a été réalisée sur la colonne droite de Cadmium dopée avant son
utilisation et réactivée avant chaque analyse.
Préparation de la colonne réductrice de Cadmium
Le grain de Cadmium utilisé est d environ 0.5 à 2mm de diamètre, la préparation est
réalisée comme suit :
Laver le Cadmium avec de l acide chlorhydrique 2mol/l puis rincer à l eau
distillée.
Laver directement avec de l acide nitrique 0.3mol/l puis passer à l eau distillée.
Laver une deuxième fois avec de l acide chlorhydrique 2mol/l pour éliminer le
nitrate résiduel puis rincer abondamment à l eau distillée.
Vider au maximum la colonne sans la laisser à l air libre et ajouter au attendre la
solution du sulfate de cuivre et laisser en contacte plusieurs minutes.
Laver abondamment la colonne avec de l eau déminéralisée.
Laver et remplir la colonne avec la solution tampon et laisser la pendant 24 à 48
heurs.
L activation de la réduction du réducteur est réalisée par le passage sur la colonne,
de 500ml de solution tampon à laquelle nous avons rajoutés 10ml d étalon de
nitrate à 5000µmol/l, puis rinçage de la colonne impérativement avec la solution
tampon (préparation de la solution tampon : dans 500ml d'eau distillée ajouter
10ml de solution de chlorure d'ammonium puis 10ml de solution d'hydroxyde de
sodium et mélanger).