Chapitre I
Matériel et méthodes
14
- L eau prélevée est filtrée à l aide d un filtre de 1000µm puis congelée et stockée
jusqu'au jour des analyses
- Les protocoles de dosages sont ceux de [AMINOT et CHAUSSEPIED, 1983].
- Le spectrophotomètre utilisé est le même que celui utilisé pour le dosage de la
chlorophylle-a.
- Les réactifs pour les dosages ont été préparés une seule fois et cela au début de
l analyse des sels nutritifs et de leurs gamme étalons (Annexes : réactifs).
a. L azote ammoniacal :
Protocole de dosage
Mode opératoire :
- Prendre 100 ± 5ml d eau de l échantillon ;
- Ajouter 3,0ml du réactif 1(Annexe 1) ;
- Boucher et agiter pour bien homogénéiser ;
- Ajouter sans attendre 3,0ml du réactif 2 (Annexe 1);
- Boucher et agiter à nouveau ;
- Placer immédiatement à l abri de la lumière pendant 6 à 8 heures (ou mieux
pendant une nuit) à température ambiante
- Mesurer l absorbance au spectrophotomètre à 665µm par rapport au blanc de cuve
(eau distillée), au blanc de l échantillon (eau de mer) et au blanc de réactif
(mélanger 50ml de réactif 1 plus 50ml de réactif 2)
Préparation de la gamme étalon
Introduire 0,5-1-2,5-5-10-25-50-100-250ml de la solution étalon secondaire déluée à
500µmol/l et compléter à 500ml avec l eau de mer soit une gamme de concentration de
0,5-1-2,5-5-10-25-50-100-250µmol/l ;
Analyser à 630µm les différentes solutions, ainsi que l eau douce ayant servi à préparer la
gamme étalon.
Retrancher des mesures d absorbance la valeur obtenue avec l eau de mer et tracer la
courbe d étalonnage. (Figure 1.10)
b. Les nitrites (NO 2
- )
Mode opératoire
La température des échantillons doit être comprise entre 15 et 25°c
Rincer une éprouvette de 50ml avec l eau à analyser et y introduire 50±1ml de
l échantillon.
Ajouter 1 ml du réactif 1(Annexe 4) et mélanger.
Laisser reposer 2 à 8 minutes.
Ajouter 1ml réactif 2 (Annexe 4) et mélanger.
Matériel et méthodes
14
- L eau prélevée est filtrée à l aide d un filtre de 1000µm puis congelée et stockée
jusqu'au jour des analyses
- Les protocoles de dosages sont ceux de [AMINOT et CHAUSSEPIED, 1983].
- Le spectrophotomètre utilisé est le même que celui utilisé pour le dosage de la
chlorophylle-a.
- Les réactifs pour les dosages ont été préparés une seule fois et cela au début de
l analyse des sels nutritifs et de leurs gamme étalons (Annexes : réactifs).
a. L azote ammoniacal :
Protocole de dosage
Mode opératoire :
- Prendre 100 ± 5ml d eau de l échantillon ;
- Ajouter 3,0ml du réactif 1(Annexe 1) ;
- Boucher et agiter pour bien homogénéiser ;
- Ajouter sans attendre 3,0ml du réactif 2 (Annexe 1);
- Boucher et agiter à nouveau ;
- Placer immédiatement à l abri de la lumière pendant 6 à 8 heures (ou mieux
pendant une nuit) à température ambiante
- Mesurer l absorbance au spectrophotomètre à 665µm par rapport au blanc de cuve
(eau distillée), au blanc de l échantillon (eau de mer) et au blanc de réactif
(mélanger 50ml de réactif 1 plus 50ml de réactif 2)
Préparation de la gamme étalon
Introduire 0,5-1-2,5-5-10-25-50-100-250ml de la solution étalon secondaire déluée à
500µmol/l et compléter à 500ml avec l eau de mer soit une gamme de concentration de
0,5-1-2,5-5-10-25-50-100-250µmol/l ;
Analyser à 630µm les différentes solutions, ainsi que l eau douce ayant servi à préparer la
gamme étalon.
Retrancher des mesures d absorbance la valeur obtenue avec l eau de mer et tracer la
courbe d étalonnage. (Figure 1.10)
b. Les nitrites (NO 2
- )
Mode opératoire
La température des échantillons doit être comprise entre 15 et 25°c
Rincer une éprouvette de 50ml avec l eau à analyser et y introduire 50±1ml de
l échantillon.
Ajouter 1 ml du réactif 1(Annexe 4) et mélanger.
Laisser reposer 2 à 8 minutes.
Ajouter 1ml réactif 2 (Annexe 4) et mélanger.