Chapitre II : Matériel et Méthodes
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II.3.2.8.2.
La loi de Beer-Lambert
L'intensité de l'absorption dépend directement du nombre de particules absorbant la lumière selon la
loi de Beer-Lambert. D'après cette dernière, la densité optique d'une solution d'une substance
absorbante dans un solvant transparent est proportionnelle à l'épaisseur de la solution traversée et à la
concentration des substances absorbante de la solution (Audigié et al, 1985).
í µí° í µí¿ = í µí° í µí¿ í µí°í µí°±í µí°© (−í µí°í µí°í µí°)
(í µí¿. í µí¿)
La lecture s'effectue en absorbance (A) ou en densité optique (í µí°·í µí±) :
í µí° = í µí°í µí¿ = í µí°¥í µí°¨í µí° (í µí° í µí¿ í µí°) = í µí°¤. í µí°. í µí°
⁄
(í µí¿. í µí¿)
Où :
I ; Intensité de l'énergie lamineuse transmise.
I 0 : Intensité de l'énergie lamineuse émise.
k : Coefficient d’extinction molaire (constante).
L : Longueur du trajet optique.
C : Concentration de l'élément absorbant.
II.3.2.8.3.
Etalonnage
L'étalonnage doit être réalisé très soigneusement, dans un domaine de concentration où la loi de Béer
Lambert est respectée. La mesure de la concentration d'un élément dans l'échantillon est déterminée à
partir d'une courbe d'étalonnage. La gamme d'étalonnage doit autant que possible être comprise autour
de valeurs de l'échantillon à analyser. Les solutions étalons sont préparées à partir de solution mère qui
a une concentration connue en g/1 de l'élément à doser. Les standards ne sont préparés qu'au moment
de l'analyse.
Tableau 3 Concentration des solutions standards utilisées (ug/ml).
Métaux
S1
S2
S3
Hg
5
10
15
Zn
1000
2000
3000
Cu
500
1000
1500
II.3.2.9.
Calcul des concentrations des métaux lourds
Pour obtenir les concentrations des métaux lourds étudiés, nous avons établi l'équation de la droite
d'étalonnage par régression linéaire. Cette équation a la forme suivante :
í µí°·. 0 = í µí±í µí°¶ + í µí°µ
(2.4)
Quand cette équation est définie (valeur de a (pente de la droite) et de b (ordonné à l'origine)) nous
avons calculé la concentration des échantillons à partir de leur absorbance (D.O). Dans une seconde
étape, nous avons calculé la concentration finale des échantillons selon la relation suivante :
[C] F = (([C] écha − [C] blanc )/P) ∗ V
(2.5)
Où :
[C] F : Concentration finale du métal exprimée en (mg/kg)
[C] écha : Concentration de l'échantillon donnée par l'équation de la droite d'étalonnage exprimée
en (μg/ml)
[C] blanc : Concentration du blanc (μg/ml)
V : Volume final de la solution d'échantillon (50 ml)
P : Poids du sédiment minéralisé en (g)
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II.3.2.8.2.
La loi de Beer-Lambert
L'intensité de l'absorption dépend directement du nombre de particules absorbant la lumière selon la
loi de Beer-Lambert. D'après cette dernière, la densité optique d'une solution d'une substance
absorbante dans un solvant transparent est proportionnelle à l'épaisseur de la solution traversée et à la
concentration des substances absorbante de la solution (Audigié et al, 1985).
í µí° í µí¿ = í µí° í µí¿ í µí°í µí°±í µí°© (−í µí°í µí°í µí°)
(í µí¿. í µí¿)
La lecture s'effectue en absorbance (A) ou en densité optique (í µí°·í µí±) :
í µí° = í µí°í µí¿ = í µí°¥í µí°¨í µí° (í µí° í µí¿ í µí°) = í µí°¤. í µí°. í µí°
⁄
(í µí¿. í µí¿)
Où :
I ; Intensité de l'énergie lamineuse transmise.
I 0 : Intensité de l'énergie lamineuse émise.
k : Coefficient d’extinction molaire (constante).
L : Longueur du trajet optique.
C : Concentration de l'élément absorbant.
II.3.2.8.3.
Etalonnage
L'étalonnage doit être réalisé très soigneusement, dans un domaine de concentration où la loi de Béer
Lambert est respectée. La mesure de la concentration d'un élément dans l'échantillon est déterminée à
partir d'une courbe d'étalonnage. La gamme d'étalonnage doit autant que possible être comprise autour
de valeurs de l'échantillon à analyser. Les solutions étalons sont préparées à partir de solution mère qui
a une concentration connue en g/1 de l'élément à doser. Les standards ne sont préparés qu'au moment
de l'analyse.
Tableau 3 Concentration des solutions standards utilisées (ug/ml).
Métaux
S1
S2
S3
Hg
5
10
15
Zn
1000
2000
3000
Cu
500
1000
1500
II.3.2.9.
Calcul des concentrations des métaux lourds
Pour obtenir les concentrations des métaux lourds étudiés, nous avons établi l'équation de la droite
d'étalonnage par régression linéaire. Cette équation a la forme suivante :
í µí°·. 0 = í µí±í µí°¶ + í µí°µ
(2.4)
Quand cette équation est définie (valeur de a (pente de la droite) et de b (ordonné à l'origine)) nous
avons calculé la concentration des échantillons à partir de leur absorbance (D.O). Dans une seconde
étape, nous avons calculé la concentration finale des échantillons selon la relation suivante :
[C] F = (([C] écha − [C] blanc )/P) ∗ V
(2.5)
Où :
[C] F : Concentration finale du métal exprimée en (mg/kg)
[C] écha : Concentration de l'échantillon donnée par l'équation de la droite d'étalonnage exprimée
en (μg/ml)
[C] blanc : Concentration du blanc (μg/ml)
V : Volume final de la solution d'échantillon (50 ml)
P : Poids du sédiment minéralisé en (g)