Chapitre 2
Matériels & Méthodes
64
2.3.2.6.2. Dosage des nitrites
Le dosage des nitrites (í µí±í µí± 2
− ) est réalisé selon la méthode de GRIESS qui repose sur
la formation d'un complexe coloré par réaction de diazotation entre l'ion nitrite, une amine
primaire aromatique, la Sulfanilamide et une autre amine aromatique, le Dihydrochlorure
de N-(1-naphthyl)-éthylène diamine (NED). En effet, Il s'agit de la réaction de GRIESS,
réaction de diazotation spécifique de l'acide nitreux, qui se produit en deux étapes : L’ion
nitrite réagit avec le sulfanilamide (4-H2NC6H4SO2NH2) pour former un composé diazoïque
(sel de diazonium) qui se combine ensuite en milieu acide (pH<2) avec le NED pour former
un composé rosé dont l’absorbance à 540nm (Benschneider et Robinson, 1952
et SKALAR, 1998 in LOURGUIOUI, 2007) est proportionnelle à la concentration des ions
nitrite.
Sulfanilamide
Phényldiazonium
Dihydrochlorure de N-(1-naphthyl)Éthylène diamine (NED)
Figure 2.21 : Réactifs de GRIESS pour le dosage des nitrites
2.3.2.6.3. Dosage des nitrates
Selon WOOD et al. (1967 in LOURGUIOUI, 2007), Le passage des échantillons dans
une colonne de cadmium traité au cuivre permet la réduction des nitrates (í µí±í µí± 3
− ) en nitrites
(í µí±í µí± 2
− ). Ces dernières (í µí±í µí± 2
− initiaux + í µí±í µí± 3
− réduits) seront ensuite dosées par colorimétrie
selon la méthode précédemment décrite. D’après RODIER et al. (1996), les concentrations
de nitrates sont obtenues après la soustraction des concentrations de nitrites déterminés,
antérieurement, avant le passage des échantillons dans la colonne réductrice.
2.3.2.6.4. Dosage des orthophosphates
Le principe du dosage des orthophosphates selon la méthode de MURPHY et RILEY
(1962) repose sur la réaction de l'anion orthophosphate (í µí±í µí± 4
3−
) avec l’ion molybdate
d'ammoniumet l’ion oxydrate de potassium (Antimoine) en milieu acide pour la formation de
l'acide phosphomolybdique. Cet acide est réduit par l'acide ascorbique en bleu de molybdène
dont l'absorbance à 880nm est proportionnelle à la concentration de l’ion orthophosphate
présent dans un échantillon.
2.3.2.6.5. Dosage du silicium dissout
Présent à 95 % sous forme d’acide orthosilicique Si(OH)4 (AMINOT et
CHAUSSEPIED, 1983) le silicium dissous réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu
acide pour former un complexe silicomolybdique qui réduit par l’acide ascorbique donne un
composé coloré en bleu absorbant à 810 nm (MULLIN et RILEY, 1955 in LOURGUIOUI,
2007). L’ajout de l’acide oxalique évite l’interférence des phosphates.
Matériels & Méthodes
64
2.3.2.6.2. Dosage des nitrites
Le dosage des nitrites (í µí±í µí± 2
− ) est réalisé selon la méthode de GRIESS qui repose sur
la formation d'un complexe coloré par réaction de diazotation entre l'ion nitrite, une amine
primaire aromatique, la Sulfanilamide et une autre amine aromatique, le Dihydrochlorure
de N-(1-naphthyl)-éthylène diamine (NED). En effet, Il s'agit de la réaction de GRIESS,
réaction de diazotation spécifique de l'acide nitreux, qui se produit en deux étapes : L’ion
nitrite réagit avec le sulfanilamide (4-H2NC6H4SO2NH2) pour former un composé diazoïque
(sel de diazonium) qui se combine ensuite en milieu acide (pH<2) avec le NED pour former
un composé rosé dont l’absorbance à 540nm (Benschneider et Robinson, 1952
et SKALAR, 1998 in LOURGUIOUI, 2007) est proportionnelle à la concentration des ions
nitrite.
Sulfanilamide
Phényldiazonium
Dihydrochlorure de N-(1-naphthyl)Éthylène diamine (NED)
Figure 2.21 : Réactifs de GRIESS pour le dosage des nitrites
2.3.2.6.3. Dosage des nitrates
Selon WOOD et al. (1967 in LOURGUIOUI, 2007), Le passage des échantillons dans
une colonne de cadmium traité au cuivre permet la réduction des nitrates (í µí±í µí± 3
− ) en nitrites
(í µí±í µí± 2
− ). Ces dernières (í µí±í µí± 2
− initiaux + í µí±í µí± 3
− réduits) seront ensuite dosées par colorimétrie
selon la méthode précédemment décrite. D’après RODIER et al. (1996), les concentrations
de nitrates sont obtenues après la soustraction des concentrations de nitrites déterminés,
antérieurement, avant le passage des échantillons dans la colonne réductrice.
2.3.2.6.4. Dosage des orthophosphates
Le principe du dosage des orthophosphates selon la méthode de MURPHY et RILEY
(1962) repose sur la réaction de l'anion orthophosphate (í µí±í µí± 4
3−
) avec l’ion molybdate
d'ammoniumet l’ion oxydrate de potassium (Antimoine) en milieu acide pour la formation de
l'acide phosphomolybdique. Cet acide est réduit par l'acide ascorbique en bleu de molybdène
dont l'absorbance à 880nm est proportionnelle à la concentration de l’ion orthophosphate
présent dans un échantillon.
2.3.2.6.5. Dosage du silicium dissout
Présent à 95 % sous forme d’acide orthosilicique Si(OH)4 (AMINOT et
CHAUSSEPIED, 1983) le silicium dissous réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu
acide pour former un complexe silicomolybdique qui réduit par l’acide ascorbique donne un
composé coloré en bleu absorbant à 810 nm (MULLIN et RILEY, 1955 in LOURGUIOUI,
2007). L’ajout de l’acide oxalique évite l’interférence des phosphates.