Chapitre 3
Matériels et méthodes
37
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes.
2.3 Dosage des hydrocarbures poly aromatiques
Avant d’être analysés, les hydrocarbures doivent êtres subir un prétraitement :
2.3.1 Extraction
La procédure d’extraction est celle décrit par Roussel, (1983). C’est une extraction
liquide-liquide réalisée par l’hexane. Ce dernier est un solvant organique plus léger que l’eau,
au moment de l’agitation il permet la dispersion du solvant dans l’eau de mer et la formation
d’une phase organique non miscible à la phase, piégeant ainsi les hydrocarbures présents dans
l’eau.
En ajoutant 50 ml de l’hexane, on procède à une agitation mécanique dans des ampoules à
décanter de 2 l, pendant une durée de 20 mn environ. A la fin de chaque agitation, on laisse
l’eau de mer se décanter pour un quart d’heure.
Après décantation, la phase organique supérieure de l’ampoule est récupérée dans un
erlenmeyer à col rodé où l’on ajoute du sodium anhydre (Na2SO4) afin d’éliminer toute trace
d’eau (Smail et Mazouz, 1996).
2.3.2 Concentration
La concentration de l’extrait d’eau de mer est réalisée dans le but d’éliminer le solvant
d’extraction à l’aide d’un évaporateur rotatif (LABOROTA 4000-efficient Heidolph). Pour
éviter l’évaporation des hydrocarbures aromatiques à point d’ébullition bas, on concentre nos
échantillons jusqu’à un volume de 15 ml. Pour minimiser cette perte, on maintient le bain-marie
à une température de 60°C et la pression d’aspiration est maintenue à 1,5 bar. Il subit ensuite
une deuxième concentration sous jet d’azote jusqu’à un volume de 5 ml.
Figure 10:L'appareil Rota-vapeur
2.3.3 Purification
La purification de l’extrait d’eau de mer est généralement réalisée par chromatographie
liquide sur colonne ouverte de 10 mm de diamètre pour la rétention des composés polaires (les
Matériels et méthodes
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Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes.
2.3 Dosage des hydrocarbures poly aromatiques
Avant d’être analysés, les hydrocarbures doivent êtres subir un prétraitement :
2.3.1 Extraction
La procédure d’extraction est celle décrit par Roussel, (1983). C’est une extraction
liquide-liquide réalisée par l’hexane. Ce dernier est un solvant organique plus léger que l’eau,
au moment de l’agitation il permet la dispersion du solvant dans l’eau de mer et la formation
d’une phase organique non miscible à la phase, piégeant ainsi les hydrocarbures présents dans
l’eau.
En ajoutant 50 ml de l’hexane, on procède à une agitation mécanique dans des ampoules à
décanter de 2 l, pendant une durée de 20 mn environ. A la fin de chaque agitation, on laisse
l’eau de mer se décanter pour un quart d’heure.
Après décantation, la phase organique supérieure de l’ampoule est récupérée dans un
erlenmeyer à col rodé où l’on ajoute du sodium anhydre (Na2SO4) afin d’éliminer toute trace
d’eau (Smail et Mazouz, 1996).
2.3.2 Concentration
La concentration de l’extrait d’eau de mer est réalisée dans le but d’éliminer le solvant
d’extraction à l’aide d’un évaporateur rotatif (LABOROTA 4000-efficient Heidolph). Pour
éviter l’évaporation des hydrocarbures aromatiques à point d’ébullition bas, on concentre nos
échantillons jusqu’à un volume de 15 ml. Pour minimiser cette perte, on maintient le bain-marie
à une température de 60°C et la pression d’aspiration est maintenue à 1,5 bar. Il subit ensuite
une deuxième concentration sous jet d’azote jusqu’à un volume de 5 ml.
Figure 10:L'appareil Rota-vapeur
2.3.3 Purification
La purification de l’extrait d’eau de mer est généralement réalisée par chromatographie
liquide sur colonne ouverte de 10 mm de diamètre pour la rétention des composés polaires (les