Matériel et Méthodes
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Purification et fractionnement
Cette étape permet d’éliminer les composés organiques polaires tels que les lipides, les
acides gras ainsi que toute impureté. Cette purification est nécessaire, elle a pour objet
d’éliminer tous composés qui peuvent causer des interférences au moment des analyses avec
les hydrocarbures.
Elle permet aussi la division de l’échantillon extrait en deux fractions : l’une aliphatique (F1)
et l’autre aromatique (F2).
Dans cette étape, on utilise la chromatographie sur colonne ouverte remplie de deux
adsorbants : gel de silice et l’alumine qui représentent la phase stationnaire solide (doivent
être conditionnés). L’alumine neutre avec son pouvoir de purification qui permet
l’élimination des composés polaires et le gel de silice avec son pouvoir de séparation et/ou
rôle de fractionnement.
Préparation de la colonne : Pour cette étape, le matériel nécessaire est le suivant :
Une burette de 50ml de contenance, 10mm de diamètre interne et munie d’un robinet
en téflon.
2 paires de pinces en acier inoxydable.
Laine de verre extraite.
Longue tige de verre d’environ 7.5mm de diamètre.
Support à burette.
Becher d’environ 200ml, 50ml.
Entonnoir à liquide d’environ 4cm de diamètre supérieur.
Papier aluminium.
Spatule, Balance ; Hexane.
Silice fraîchement conditionnée.
Alumine fraîchement conditionnée.
Na 2 So 4 fraîchement conditionnée.
Les étapes à suivre pour la purification
Rincer à l’hexane, l’intérieur et l’embout d’une colonne pour chromatographie.
A l’aide de deux paires de pinces préalablement rincées à l’hexane, découper
suffisamment de laine de verre extraite pour mettre dans le bas de la colonne.
Placer la laine de verre à l’aide d’une longue tige de verre rincée à l’hexane, puis tasser
la laine de verre dans le bas de la colonne.
Rincer à l’hexane un entonnoir et la colonne.
Vider complétement la colonne.
Remplir la colonne à moitié avec l’hexane, couvrir avec une feuille de papier aluminium
traité
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Purification et fractionnement
Cette étape permet d’éliminer les composés organiques polaires tels que les lipides, les
acides gras ainsi que toute impureté. Cette purification est nécessaire, elle a pour objet
d’éliminer tous composés qui peuvent causer des interférences au moment des analyses avec
les hydrocarbures.
Elle permet aussi la division de l’échantillon extrait en deux fractions : l’une aliphatique (F1)
et l’autre aromatique (F2).
Dans cette étape, on utilise la chromatographie sur colonne ouverte remplie de deux
adsorbants : gel de silice et l’alumine qui représentent la phase stationnaire solide (doivent
être conditionnés). L’alumine neutre avec son pouvoir de purification qui permet
l’élimination des composés polaires et le gel de silice avec son pouvoir de séparation et/ou
rôle de fractionnement.
Préparation de la colonne : Pour cette étape, le matériel nécessaire est le suivant :
Une burette de 50ml de contenance, 10mm de diamètre interne et munie d’un robinet
en téflon.
2 paires de pinces en acier inoxydable.
Laine de verre extraite.
Longue tige de verre d’environ 7.5mm de diamètre.
Support à burette.
Becher d’environ 200ml, 50ml.
Entonnoir à liquide d’environ 4cm de diamètre supérieur.
Papier aluminium.
Spatule, Balance ; Hexane.
Silice fraîchement conditionnée.
Alumine fraîchement conditionnée.
Na 2 So 4 fraîchement conditionnée.
Les étapes à suivre pour la purification
Rincer à l’hexane, l’intérieur et l’embout d’une colonne pour chromatographie.
A l’aide de deux paires de pinces préalablement rincées à l’hexane, découper
suffisamment de laine de verre extraite pour mettre dans le bas de la colonne.
Placer la laine de verre à l’aide d’une longue tige de verre rincée à l’hexane, puis tasser
la laine de verre dans le bas de la colonne.
Rincer à l’hexane un entonnoir et la colonne.
Vider complétement la colonne.
Remplir la colonne à moitié avec l’hexane, couvrir avec une feuille de papier aluminium
traité