Chapitre 3
Matériel et Méthode
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3.1.8.3.4 Mesure‎d’absorbance‎:‎Méthode‎de‎LORENZEN
-Transférer le surnageant de centrifugation dans la cuve de spectromètre ; on évite
l’entrainement de fibres de verre en aspirant l’extrait à l’aide, par exemple, d’une seringue
de verre.
-Mettre la cuve en place et s’assurer de son positionnement correct.
-Mesurer les absorbances brutes des extraits non acidifiés aux longueurs d’ondes de
665 et 750 nm, soit Ab 665
na et Ab 750
na . La mesure à 750 nm doit être restée inférieur à
0,005 par centimètre de trajet optique.
-Acidifier par addition de 10 μl d’acide chlorhydrique 0,3 mol/l par millilitre d’extrait
(Soit une goute pour environ 5 ml) directement dans la cuve et attendre 2 à 3 min.
- Mesurer les absorbances brutes des extraits acidifiés à 665 et 750 nm, soit Ab 665
a
etAb 750
a .
3.1.8.3.5 Calcule et expression des résultats :
Les absorbances brutes à 665 nm et les blancs de turbidité à 750 nm doivent être corrigés
en soustrayant les blancs des cuves puis on obtient les absorbances nettes en soustrayant
les absorbances corrigés mesurés à 750 nm des absorbances corrigées mesurées à 665 nm,
c’est à- dire :
 Avant acidification :
A665na = (Ab665na - bc665) – (Ab750na –bc750)
 Après acidification:
A665a= (Ab665a - bc665) – (Ab750a –bc750)
Les autres données sont :
- V : volume d’eau filtrée (litres).
- v : volume de solvant d’extraction (millilitres).
- l : longueur de trajet optique de la cuve de mesure (centimètre).
- mh : masse de sédiment humide qui égale à 7g.
- ms : masse de sédiment sec qui égale à 5g.