Chapitre 3
Matériel et Méthode
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 Centrifugeuse Hettich ZENTRIFUGEN de type EBA 30, avec 12 postes de
porte-Filtre.
 Spectrophotomètre fluorescence, modèle TURNER DESIGNR 10-AU.
 Matériels courant de laboratoire.
3.1.8.2 Réactifs
Suspension carbonate de magnésium MgCO3 à 1 % ;
Solvant d'extraction : acétone à 90%.
Solution d'acide chloridrique 0,5N.
3.1.8.3 Mode opératoire
3.1.8.3.1 Analyse au laboratoire
L’analyse de la chlorophylle nécessite une protection permanente contre la lumière à toutes
les étapes du protocole analytique, car ces pigments sont photosensibles.
3.1.8.3.2 Filtration et conservation
-Dès le retour au laboratoire on filtre l’eau le plus rapidement possible et on ajoute
quelques gouttes de MgCO 3 sur le filtre.
-Le filtre est plié en quatre et enrobé dans un papier aluminium préalablement étiqueté.
Mettre les filtres dans le congélateur pour une analyse ultérieure.
3.1.8.3.3 Extraction des pigments
- On enveloppe les tubes dans une feuille d’aluminium.
- Introduire le filtre dans un tube à centrifuger et ajouter 10 ml d’acétone 90%
- Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette ou d’un tube de verre, boucher et agiter pour
disperser les fibres.
- Laisser l’extraction se poursuivre 24h au réfrigérateur dans l’acétone.
Laisser refroidir à température ambiante.
- Centrifuger 1 min, pour faire tomber les fibres de verres.
- Centrifuger à nouveau 5 à 10 min a 3000-4000 tr/min (les tubes doivent rester boucher
pour éviter l’évaporation). Dans un solvant qui assure l’extraction des pigments ; puis on
mesure