Chapitre III : Applications des techniques de génétique
moléculaire dans l’identification des poissons
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Le programme d’amplification consiste en une dénaturation de 5 minutes à 94° C, puis
en 44 cycles de dénaturation à 94° C(45 sec), une hybridation à 37° C (1 mn) et une
polymérisation à 72° C (2 mn), suivis d’unephase d’élongation finale de 10 mn à 72° C.
Les produits d’amplification sont visualisés parune électrophorèse sur un gel d’agarose à 2
%, coloré au bromure d’éthidium. La durée demigration est de 3 h à 100 V(Choui, 2007).
Les amorces RAPD utilisées ont produit des fragments ayant des tailles comprises
entre 165 et 650 pb. Parmi les 29 bandes obtenues, 19 sont polymorphes, soient six pour
l’amorce A-01(A-01 380, A-01 460, A-01 550 , A-01 600, A-01 630 et A-01 650) et treize
pour l’amorce
A-10 (A-10 165, A-10 180, A-10 220, A-10 280, A-10 340, A-10 380, A-10 435, A-10 480,
A- 10 490, A-10 530, A-10 560, A-10 580, A-10 600)(Choui,2007).
Figure 25 : Profils RAPD, après coloration au BET et électrophorèse sur gel d’agarose à
2 %, des produits d’amplification obtenus avec les amorces A01 et A10
(Mq: marqueur de taille, pb: paires de bases) (Chaoui,2007).