Chapitre II : Méthode d’identification
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Les amplifications sont réalisées à l’aide d’amorce définies d’après la séquence des
adaptateurs. Ces amorces portent sur leurs extrémités 3’-OH des extensions aléatoires de 1 à 3
bases permettant l’amplification sélective d’une partie seulement e la population des
fragments de restriction. Une pré-amplification est réalisée en premier à l’aide d’amorces
présentant une extension d’une base généralement (amorces+1). Le produit de cette préamplification sert de matrice pour l’amplification sélective à l’aide des amorces +3 (Tagu., et
al . 2003).
Les produits d’amplification sélective sont ensuite séparés sur gel de polyacrylamide
en condition dénaturantes .la détection des bondes d’AFLP est obtenus soit par coloration des
gels a l’argent, soit par autoradiographie ou émission de fluorescence(Tagu,et al., 2003).
Figure15 : principe générale de la technique AFLP(Huybens., et al . 2009)
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Les amplifications sont réalisées à l’aide d’amorce définies d’après la séquence des
adaptateurs. Ces amorces portent sur leurs extrémités 3’-OH des extensions aléatoires de 1 à 3
bases permettant l’amplification sélective d’une partie seulement e la population des
fragments de restriction. Une pré-amplification est réalisée en premier à l’aide d’amorces
présentant une extension d’une base généralement (amorces+1). Le produit de cette préamplification sert de matrice pour l’amplification sélective à l’aide des amorces +3 (Tagu., et
al . 2003).
Les produits d’amplification sélective sont ensuite séparés sur gel de polyacrylamide
en condition dénaturantes .la détection des bondes d’AFLP est obtenus soit par coloration des
gels a l’argent, soit par autoradiographie ou émission de fluorescence(Tagu,et al., 2003).
Figure15 : principe générale de la technique AFLP(Huybens., et al . 2009)