Chapitre III : MATERIEL ET METHODES
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5. Travaux effectués au laboratoire
5.1. Dosage des hydrocarbures polyaromatiques (HAP) dans l'eau de mer par
spectrofluorimétrie à rayonnement Ultrat-Violet
Il existe plusieurs techniques d’analyse des hydrocarbures dans l’eau de mer : les méthodes
chromatographiques (chromatographie en phase gazeuse), les méthodes spectroscopiques
(spectrofluorescence Ultra-Violet) et les méthodes couplées. Chacune présente des avantages et
des inconvénients. Le choix de la technique est fonction de sa sensibilité et du but de la
recherche.
Dans la présente étude qui a pour but d'analyser et de quantifier les HAP dans les eaux marines
de surface, dans lesquelles ces substances sont généralement présentes en très faibles quantités,
la technique d’analyse par Spectrofluorescence UV est la mieux appropriée.
Cette dernière constitue une méthode qualitative et quantitative, qui est environ 20 fois plus
sensible que la Spectrofluorimétrie Infrarouge (IR), puisqu’elle présente l’avantage d’être
extrêmement sensible aux hydrocarbures aromatiques, qui sont représentatifs d'une pollution
pétrolière dans l'environnement. C’est aussi une méthode suffisamment sélective et très sensible
pour l'eau (identification de traces d’hydrocarbures dans l’eau typiquement jusqu’à 0,1 µg/l).
La spectrofluorimétrie UV est appliquée par LEVY (1977), est préconisée par la Commission
Océanographique Intergouvernementale (COI) de l’UNESCO (1977) pour la surveillance de la
pollution par les hydrocarbures en mer (BODENNEC et al., 1981 ; COI, 1983 ; MARCHAND,
1983 ; ITOPF, 2013b).
Et comme pour toutes les méthodes d’analyse, la Spectrofluorescence UV nécessite un
traitement préalable des échantillons qui doit comprendre une purification après extraction.
5.1.1. Extraction
On procède en première étape par une extraction par un solvant organique approprié. Cette
extraction a une double finalité : faire passer les hydrocarbures dans une phase compatible avec
la méthode d’analyse considérée et réaliser une concentration volumique permettant de
multiplier la sensibilité de la technique (MARCHAND, 1983 ; BOCARD, 2006).
L’extraction dite "liquide-liquide" (ELL) est la première méthode rapportée dans la littérature
pour extraire les contaminants organiques de l’eau (MANOLI et SAMARA, 1996 in PIMSEE,
2014).
Elle consiste à mélanger l’échantillon d’eau à un solvant organique, qui est le n-Hexane pour
lequel les HAP ont une affinité importante. Cette technique est très robuste mais elle est très
consommatrice de solvant et de temps (PIMSEE, 2014).
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5. Travaux effectués au laboratoire
5.1. Dosage des hydrocarbures polyaromatiques (HAP) dans l'eau de mer par
spectrofluorimétrie à rayonnement Ultrat-Violet
Il existe plusieurs techniques d’analyse des hydrocarbures dans l’eau de mer : les méthodes
chromatographiques (chromatographie en phase gazeuse), les méthodes spectroscopiques
(spectrofluorescence Ultra-Violet) et les méthodes couplées. Chacune présente des avantages et
des inconvénients. Le choix de la technique est fonction de sa sensibilité et du but de la
recherche.
Dans la présente étude qui a pour but d'analyser et de quantifier les HAP dans les eaux marines
de surface, dans lesquelles ces substances sont généralement présentes en très faibles quantités,
la technique d’analyse par Spectrofluorescence UV est la mieux appropriée.
Cette dernière constitue une méthode qualitative et quantitative, qui est environ 20 fois plus
sensible que la Spectrofluorimétrie Infrarouge (IR), puisqu’elle présente l’avantage d’être
extrêmement sensible aux hydrocarbures aromatiques, qui sont représentatifs d'une pollution
pétrolière dans l'environnement. C’est aussi une méthode suffisamment sélective et très sensible
pour l'eau (identification de traces d’hydrocarbures dans l’eau typiquement jusqu’à 0,1 µg/l).
La spectrofluorimétrie UV est appliquée par LEVY (1977), est préconisée par la Commission
Océanographique Intergouvernementale (COI) de l’UNESCO (1977) pour la surveillance de la
pollution par les hydrocarbures en mer (BODENNEC et al., 1981 ; COI, 1983 ; MARCHAND,
1983 ; ITOPF, 2013b).
Et comme pour toutes les méthodes d’analyse, la Spectrofluorescence UV nécessite un
traitement préalable des échantillons qui doit comprendre une purification après extraction.
5.1.1. Extraction
On procède en première étape par une extraction par un solvant organique approprié. Cette
extraction a une double finalité : faire passer les hydrocarbures dans une phase compatible avec
la méthode d’analyse considérée et réaliser une concentration volumique permettant de
multiplier la sensibilité de la technique (MARCHAND, 1983 ; BOCARD, 2006).
L’extraction dite "liquide-liquide" (ELL) est la première méthode rapportée dans la littérature
pour extraire les contaminants organiques de l’eau (MANOLI et SAMARA, 1996 in PIMSEE,
2014).
Elle consiste à mélanger l’échantillon d’eau à un solvant organique, qui est le n-Hexane pour
lequel les HAP ont une affinité importante. Cette technique est très robuste mais elle est très
consommatrice de solvant et de temps (PIMSEE, 2014).