Chapitre II
MATERIEL ET METHODES
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c. Lecture
Figure II.14: lecture du test catalase.
4.5.3.6 Test d’oxydase
Ce test est réalisé à l’aide de disques prêts à l’emploi, imprégnés du réactif : Ndiméthylparaphénylène diamine, sur lequel nous avons déposé une colonie.
a. Principe
Le cytochrome oxydase est une enzyme de la chaîne respiratoire bactérienne qui catalyse des
réactions d'oxydation du type:
DH 2 + ½ O 2
D + H 2 O
En présence d'oxygène ambiant, cette enzyme peut oxyder un substrat incolore en
un produit coloré facilement repérable :
Substrat réduit incolore
Produit oxydé coloré
La recherche de l'oxydase est un test fondamental pour l'identification des bacilles à Gram
négatif.
b. Procédure
Ce test est réalisé à l’aide de disque d’oxydase prêt à l’emploi
- Déposer un disque imprégné de réactif sur une lame, l’imbiber avec une goutte d’eau
distillée stérile.
- Prélever une colonie parfaitement isolée avec une pipette Pasteur et l’écraser sur le
disque pendant une dizaine de secondes.
- Observer immédiatement
-
+
- Présence de Bulles d’oxygène  La bactérie
possède la catalase, elle est dite « catalase+ »
- Absence de bulle La bactérie ne possède pas la
catalase, elle est dite : « Catalase- »