Chapitre III
Matériel et Méthodes
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 Frapper la colonne doucement pour qu’elle ne se casse pas à l’aide d’une spatule, et
pour faire tasser l’alumine ;
 Laisser couler l’hexane en évitant l’assèchement de la colonne ;
 Peser 5g d’alumine, le mélanger avec l’hexane dans un petit bécher et le faire
introduire dans la colonne par un petit entonnoir ;
 Tasser bien l’alumine à l’aide d’une spatule ;
 Laisser couler l’hexane jusqu’à atteindre un volume de 2 ml afin d’éviter
l’assèchement de la colonne ;
 Ajouter 0,5 g de Na 2 SO 4 afin d’absorber l’eau si elle existe ;
 À présent la colonne est prête à l’utilisation, à noter qu’il faut répéter les mêmes
étapes après introduction de chaque échantillon.
Fractionnement de la phase aromatique
 Ajouter 20 ml du mélange d’hexane-dichlorométhane dans les proportions (90/10) ;
 Ajouter 30 ml du mélange hexane-dichlorométhane dans les proportions (70/30) ;
 Récupérer la deuxième fraction qui est la phase aromatique dans des tubes à essais
conditionnés ;
 Faire une deuxième concentration sous jet d’azote ;
 Conserver les échantillons au frais.
Analyse des HAP par spectrofluorimètre ultraviolet
Figure III.27: Spectrophotomètre de Fluorescence HITACHI, modèle 650 S, équipé d’une
lampe « Xénon ».