Chapitre III
Matériel et Méthodes
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Afin d’éviter les contaminations, tout instrument et verrerie utilisés, pendant toute les
étapes du présent travail sont minutieusement nettoyés et conditionnés selon le protocole
suivant :
 Laisser tremper le matériel toute une nuit dans une solution de savon dans un
bac en plastique ;
 Rincer abondamment d'abord avec de l'eau du robinet, puis avec de l'eau
bidistillée obtenue sur système Milli Q (Millipore) et ayant une résistivité de
18M ;
 Séchage à l’étuve à 70 °C pour le matériel en verre et à 40°C pour le matériel
en polyéthylène (tels que les flacons et les sacs de conservations) ;
 Laisser tremper le matériel dans une solution d'acide nitrique 10% (v/v) préparée à
partir d’acide nitrique (HNO3) concentré à 68% pour analyse ; pendant au
moins un jour à température ambiante ;
 Rincer abondamment avec de l'eau bidistillée Milli-Q (au moins 4 fois) ;
 Mettre le matériel à sécher sous une hotte à flux laminaire ;
 Stocker le matériel dans des sacs en polyéthylène fermés hermétiquement.
Cette opération doit être effectuée impérativement avant chaque utilisation du matériel
Le Traitement des échantillons Le traitement de l’échantillon s’effectue en quatre étapes :
B-Lyophilisation
C'est la déshydratation par sublimation des échantillons à - 40° C et sous vides (10 bars)
pendant 48 h par un lyophilisateur (modèle Christ Betta 1-8) fig. 21.
Figure III.18 : Lyophilisateur (modèle Christ Betta 1-8).