Chapitre II : Matériel et méthodes
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Méthode 2
Les composés actifs dans Crambe crambe sont particuliers , en raison de sa gamme de polarité et
de sa variété: jusqu'à 4 crambines (plusieurs homologues) et 4 crambescidines ont été décrits .
Ces composés confèrent un mélange de propriétés lipophiles et hydrophiles. Des études
Préliminaires ont été menées pour déterminer une méthode pour une extraction facile de toutes
ces familles de composés. Ces études sont expliquées en entier à Becerro (1994) et peuvent se
résumer comme suit: après avoir essayé toutes les séquences possibles avec des solvants
couvrant une grande gamme de polarités (hexane, dichlorométhane et eau), nous avons constaté
qu'une seule extraction avec du dichlorométhane (DCM) qui reprend tous les composés toxiques
et aucune toxicité n’a été détectée si les tissus ont été extraits après avec l'un des autres solvants.
Après la sixième plongée (06 /09/2017) les fragments de l'éponge ont été immédiatement pris au
laboratoire, légèrement rincé (quatre secondes) avec l’eau distillée , nettoyés . Le rinçage à l'eau
était nécessaire pour éliminer les sels retenus dans le système canal de l'éponge .
L’échantillon frais de l’éponge marine C. crambe (26.65 g) a été mis à macérer successivement
dans le dichlorométhane( 3 macérations ) à température ambiante . Après 24h nous avons filtré
pour obtenir l’extrais A et à partir de cet extrais nous avons effectué une extraction liquide
liquide par l’eau et le méthanol (1:1 ) .
Les extraits bruts, obtenus sont référencés, photographiés . Ces extrais sont ensuite stockés à -18°C en attendant l’identification par GC / MS .
CH2Cl2
Filtration
L’eau et le méthanol(1:1 )
GC/MS
éponge frais
(26.65 g)
Macération ( 24h)
Extrait brut
Identification
Extraction liquide- liquide
Figure 19 : Schéma représentatif de la méthode d’extraction 2
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Méthode 2
Les composés actifs dans Crambe crambe sont particuliers , en raison de sa gamme de polarité et
de sa variété: jusqu'à 4 crambines (plusieurs homologues) et 4 crambescidines ont été décrits .
Ces composés confèrent un mélange de propriétés lipophiles et hydrophiles. Des études
Préliminaires ont été menées pour déterminer une méthode pour une extraction facile de toutes
ces familles de composés. Ces études sont expliquées en entier à Becerro (1994) et peuvent se
résumer comme suit: après avoir essayé toutes les séquences possibles avec des solvants
couvrant une grande gamme de polarités (hexane, dichlorométhane et eau), nous avons constaté
qu'une seule extraction avec du dichlorométhane (DCM) qui reprend tous les composés toxiques
et aucune toxicité n’a été détectée si les tissus ont été extraits après avec l'un des autres solvants.
Après la sixième plongée (06 /09/2017) les fragments de l'éponge ont été immédiatement pris au
laboratoire, légèrement rincé (quatre secondes) avec l’eau distillée , nettoyés . Le rinçage à l'eau
était nécessaire pour éliminer les sels retenus dans le système canal de l'éponge .
L’échantillon frais de l’éponge marine C. crambe (26.65 g) a été mis à macérer successivement
dans le dichlorométhane( 3 macérations ) à température ambiante . Après 24h nous avons filtré
pour obtenir l’extrais A et à partir de cet extrais nous avons effectué une extraction liquide
liquide par l’eau et le méthanol (1:1 ) .
Les extraits bruts, obtenus sont référencés, photographiés . Ces extrais sont ensuite stockés à -18°C en attendant l’identification par GC / MS .
CH2Cl2
Filtration
L’eau et le méthanol(1:1 )
GC/MS
éponge frais
(26.65 g)
Macération ( 24h)
Extrait brut
Identification
Extraction liquide- liquide
Figure 19 : Schéma représentatif de la méthode d’extraction 2