MATERIEL ET METHODES
2019
32
III.1.4. Le traitement des hydrocarbures dans l’eau
1 ère étape : nous avons réalisé une extraction in situ le jour de prélèvement avec 50 ml d’hexane
Au laboratoire
a. Extraction des hydrocarbures
Verser dans une ampoule à décanter le volume total de l’échantillon. (Figure 09)
En ajoutant 50 ml de l’hexane,
Agiter l’ampoule à décanter pendant une durée de 20 minutes environ avec dégazage 2 à 3s. A la
fin de chaque agitation, on laisse l’eau de mer se décanter pour un quart d’heure.
Après décantation, la phase organique supérieure de l’ampoule est récupérée dans un ballon à col
rodé ou l’on ajoute du sodium anhydre (Na2SO4) afin d’éliminer toute trace d’eau
b. Concentration
Cette opération est réalisée dans le but d’éliminer le solvant d’extraction à l’aide d’un
évaporateur rotatif à 40°C. L’échantillon est concentré jusqu’un volume de 10 ml. (Figure 09) qui
permet la concentration de l’échantillon et l’évaporation de l’hexane sous jet d’azote, cette étape
nous permet de récupérer 2 ml d’échantillon.
2 ème étape :
c. Séparation et Purification des hydrocarbures aliphatiques des aromatiques
La séparation est généralement réalisée par chromatographie liquide sur colonne ouverte de 10 mm
de diamètre, elle consiste à éliminer les composés polaires ainsi que toutes impuretés.
Préparer la colonne de purification (ø 1 cm) comme suit :
• Placer dans la colonne du coton de laine de verre.
• Verser 15ml d’hexane (pour le conditionnement de la colonne).
• 10g de gel de silice et 5g d’alumine mélangé avec l’hexane.
• Na2SO4 ajouté pour éliminer l’humidité.
• Attention : la colonne doit toujours être sous solvant : arrêter les élutions quand le niveau du
solvant arrive au niveau de la couche supérieure de l’alumine.
• Introduire l’extrait (les 5 ml récupérer de la 1
ère étape) après leur agitation avec un agitateur
mécanique.
• Ajouter 20 ml d’hexane et récupérer après décantation la première fraction aliphatique(F1) dans
un tube à essai.
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III.1.4. Le traitement des hydrocarbures dans l’eau
1 ère étape : nous avons réalisé une extraction in situ le jour de prélèvement avec 50 ml d’hexane
Au laboratoire
a. Extraction des hydrocarbures
Verser dans une ampoule à décanter le volume total de l’échantillon. (Figure 09)
En ajoutant 50 ml de l’hexane,
Agiter l’ampoule à décanter pendant une durée de 20 minutes environ avec dégazage 2 à 3s. A la
fin de chaque agitation, on laisse l’eau de mer se décanter pour un quart d’heure.
Après décantation, la phase organique supérieure de l’ampoule est récupérée dans un ballon à col
rodé ou l’on ajoute du sodium anhydre (Na2SO4) afin d’éliminer toute trace d’eau
b. Concentration
Cette opération est réalisée dans le but d’éliminer le solvant d’extraction à l’aide d’un
évaporateur rotatif à 40°C. L’échantillon est concentré jusqu’un volume de 10 ml. (Figure 09) qui
permet la concentration de l’échantillon et l’évaporation de l’hexane sous jet d’azote, cette étape
nous permet de récupérer 2 ml d’échantillon.
2 ème étape :
c. Séparation et Purification des hydrocarbures aliphatiques des aromatiques
La séparation est généralement réalisée par chromatographie liquide sur colonne ouverte de 10 mm
de diamètre, elle consiste à éliminer les composés polaires ainsi que toutes impuretés.
Préparer la colonne de purification (ø 1 cm) comme suit :
• Placer dans la colonne du coton de laine de verre.
• Verser 15ml d’hexane (pour le conditionnement de la colonne).
• 10g de gel de silice et 5g d’alumine mélangé avec l’hexane.
• Na2SO4 ajouté pour éliminer l’humidité.
• Attention : la colonne doit toujours être sous solvant : arrêter les élutions quand le niveau du
solvant arrive au niveau de la couche supérieure de l’alumine.
• Introduire l’extrait (les 5 ml récupérer de la 1
ère étape) après leur agitation avec un agitateur
mécanique.
• Ajouter 20 ml d’hexane et récupérer après décantation la première fraction aliphatique(F1) dans
un tube à essai.