Chapitre II
Matériels et méthodes
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26, 7 (A 665 -A 665 ).v
[Chlorophylle a] (mg/m
3 ) =
V .L
La teneur de l’eau en matière en suspension est donnée par l’expression suivante :
P 1 : poids du filtre sec avant filtration (mg);
P 2 : poids du filtre sec après filtration (mg);
V : volume d’eau filtré (l); et
[M.E.S] : concentration de la matière en suspension (mg/l).
6- Dosage de la chlorophylle
Le phytoplancton de l’eau est en général évalué par la mesure de la chlorophylle (Rodier et
al., 1997).
 Principe de la méthode
Après filtration d’un certain volume d’eau pour concentrer le matériel particulaire, le filtre est
immergé dans un solvant qui assure l’extraction des pigments puis on mesure l’absorbance de
l’extrait avant et après acidification (Aminot et Chaussepied, 1983).
 Mode opératoire
La filtration des échantillons (environ 250 ml) est effectuée sur des filtres de type Whatman
GF/C qui retiennent les particules de taille supérieure à 0,5 µm. On dépose 1 à 2 ml d’une
solution de carbonate de magnésium (1%) pour améliorer la rétention sur les filtres et éviter
une éventuelle acidification des matières filtrées, avant et pendant l’extraction.
Les filtres mis dans des tubes à centrifuger en verre enveloppés dans une feuille d’aluminium,
sont traités à l’acétone 90 % (volume du solvant d’extraction 10 ml) et déchiquetés, ces tubes
sont placés au réfrigérateur et à l’abri de la lumière pendant 24 heures.
La mesure d’absorbance est effectuée avant et après acidification aux longueurs d’onde 665
nm et 750 nm. La teneur de l’eau en chlorophylle a est donnée par l’expression de Lorenzen
(1967) in (Aminot et Chaussepied, 1983).
na
a
V : volume d’eau filtrée (l);
v : volume de solvant d’extraction (ml);
L : longueur du trajet optique de la cuve de mesure (cm);
na
A 665 : absorbance avant acidification; et
a
A 665 : absorbance après acidification.
(P 2 - P 1 )
[M.E.S](mg/l) =
V