Chapitre II
Matériels et méthodes
13
4- Dosage des sels nutritifs
4-1- Principe de la méthode
Le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrates, nitrites, phosphates) est effectué par une
méthode qui est basée sur une réaction de coloration. Elle consiste à mesurer l'absorbance ou
la densité optique de la solution étudiée. Plus cette solution est concentrée plus elle absorbe la
lumière dans les limites de proportionnalités énoncées par la loi de Beer-Lambert.
La densité optique des solutions est déterminée par un spectrophotomètre préalablement
étalonné sur la longueur d'onde d'absorption de la solution étudiée.
Lorsqu'une lumière d'intensité I 0 passe à travers une solution, une partie de celle-ci est
absorbée par le soluté. L'intensité I de la lumière transmise est donc inférieure à I 0 . On définit
l'absorbance de la solution comme:
A : l'absorbance de la solution;
D.O : la densité optique de la solution;
I 0 : intensité lumineuse incidente;
I : intensité lumineuse transmise ;
ε : le coefficient d'extinction molaire de l'espèce absorbante en solution (mol.L.cm
-1 ) ;
L : la longueur du trajet optique (cm) ; et
C : concentration de la solution absorbante (mol.l
-1 ).
4-2- Dosage de l’ammonium (NH 4
+
)
Le dosage de l’ammonium se fait par la méthode de koroleff (1969), qui offre une bonne
précision ainsi qu’une bonne sensibilité (Aminot et Chaussepied, 1983).
En milieu alcalin et en présence de nitroprussiate qui agit comme un catalyseur, les ions
ammonium traités par une solution d’hypochlorite et de phénol donnent le bleu
d’indophénol susceptible d’un dosage par spectrophotométrie d’absorption moléculaire
(Rodier et al., 1997). Le maximum d’absorption se fait à une longueur d’onde de 630 nm.
4-3- Dosage des nitrites (NO 2
- )
Le dosage des nitrites NO 2
-
est déterminé par spectrophotométrie. La diazotation de l’amino4-benzenesulfanilamide par les nitrites en milieu acide et sa copulation avec le dichlorure de
N-(naphtyl-1) diamino-1 ,2 éthane donne un complexe coloré pourpre susceptible d’un dosage
spectrophotométrique (Rodier et al., 1997). La mesure de l’absorbance est faite à 543nm.
4-4- Dosage des nitrates (NO 3
- )
Le principe de base repose sur la réduction quasi quantitative du nitrate (NO 3
-
) en nitrite
(NO 2
-
) par le cadmium traité au cuivre (Wood et al.,1967 in Aminot et Kerouel, 2004).
A = D.O = log (I 0 /I) = ε.L.C
Matériels et méthodes
13
4- Dosage des sels nutritifs
4-1- Principe de la méthode
Le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrates, nitrites, phosphates) est effectué par une
méthode qui est basée sur une réaction de coloration. Elle consiste à mesurer l'absorbance ou
la densité optique de la solution étudiée. Plus cette solution est concentrée plus elle absorbe la
lumière dans les limites de proportionnalités énoncées par la loi de Beer-Lambert.
La densité optique des solutions est déterminée par un spectrophotomètre préalablement
étalonné sur la longueur d'onde d'absorption de la solution étudiée.
Lorsqu'une lumière d'intensité I 0 passe à travers une solution, une partie de celle-ci est
absorbée par le soluté. L'intensité I de la lumière transmise est donc inférieure à I 0 . On définit
l'absorbance de la solution comme:
A : l'absorbance de la solution;
D.O : la densité optique de la solution;
I 0 : intensité lumineuse incidente;
I : intensité lumineuse transmise ;
ε : le coefficient d'extinction molaire de l'espèce absorbante en solution (mol.L.cm
-1 ) ;
L : la longueur du trajet optique (cm) ; et
C : concentration de la solution absorbante (mol.l
-1 ).
4-2- Dosage de l’ammonium (NH 4
+
)
Le dosage de l’ammonium se fait par la méthode de koroleff (1969), qui offre une bonne
précision ainsi qu’une bonne sensibilité (Aminot et Chaussepied, 1983).
En milieu alcalin et en présence de nitroprussiate qui agit comme un catalyseur, les ions
ammonium traités par une solution d’hypochlorite et de phénol donnent le bleu
d’indophénol susceptible d’un dosage par spectrophotométrie d’absorption moléculaire
(Rodier et al., 1997). Le maximum d’absorption se fait à une longueur d’onde de 630 nm.
4-3- Dosage des nitrites (NO 2
- )
Le dosage des nitrites NO 2
-
est déterminé par spectrophotométrie. La diazotation de l’amino4-benzenesulfanilamide par les nitrites en milieu acide et sa copulation avec le dichlorure de
N-(naphtyl-1) diamino-1 ,2 éthane donne un complexe coloré pourpre susceptible d’un dosage
spectrophotométrique (Rodier et al., 1997). La mesure de l’absorbance est faite à 543nm.
4-4- Dosage des nitrates (NO 3
- )
Le principe de base repose sur la réduction quasi quantitative du nitrate (NO 3
-
) en nitrite
(NO 2
-
) par le cadmium traité au cuivre (Wood et al.,1967 in Aminot et Kerouel, 2004).
A = D.O = log (I 0 /I) = ε.L.C