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Pour chaque niveau, une portion de 2 cm est découpée en utilisant une lame rasoir, elle est
ensuite placée sur une lame bien dégraissée sous une loupe binoculaire (Motic 50122240),
pour procéder à la réalisation d’une coupe transversale très fine.
Une fois, la coupe transversale est réussie, on l’immerge avec une goutte d’éthanol entre
lame et lamelle pour procéder ensuite à l’observation sous microscope optique (S/N-EU
1630116).
Figure 9. Positions des coupes transversales le long des limbes des feuilles adultes et
intermédiaires (A : coupe basale ; B : coupe centrale ; C : coupe apicale).
2.3.2.2. Comptage des cellules à tanin
Dans le but d'adopter une méthode représentative de comptage des cellules à tanin, un
travail préliminaire a été réalisé en s’inspirant de la méthodologie adoptée par OLIVIER et
al (2019). Une centaine de coupe ont été effectuées sur lesquelles les cellules à tanin ont
été dénombrées en utilisant un microscope optique équipé d’un oculaire gradué
préalablement étalonné, pour le calcul des surfaces considérées lors des comptages (Cet
étalonnage a été réalisé à l’aide d’une lame micrométrique pour chaque objectif du
microscope). En effet, nous avons commencé tout d’abord par effectuer un comptage sur
une surface carrée de 0,03mm² en prenant en considération trois zones de comptage : le
centre et les deux extrémités de la coupe. Nous avons ensuite élargi la surface de comptage
à 0,05 mm² et en dernier nous avons procédé à un comptage sur la totalité de la coupe.
L’exploitation des résultats de ce travail préliminaire nous a permis de confirmer la non
fiabilité des deux premières méthodes et ce, en raison de l’absence d’homogénéité et de
symétrie de distribution des cellules à tanin le long de la coupe elle-même. C’est pour cette
Pour chaque niveau, une portion de 2 cm est découpée en utilisant une lame rasoir, elle est
ensuite placée sur une lame bien dégraissée sous une loupe binoculaire (Motic 50122240),
pour procéder à la réalisation d’une coupe transversale très fine.
Une fois, la coupe transversale est réussie, on l’immerge avec une goutte d’éthanol entre
lame et lamelle pour procéder ensuite à l’observation sous microscope optique (S/N-EU
1630116).
Figure 9. Positions des coupes transversales le long des limbes des feuilles adultes et
intermédiaires (A : coupe basale ; B : coupe centrale ; C : coupe apicale).
2.3.2.2. Comptage des cellules à tanin
Dans le but d'adopter une méthode représentative de comptage des cellules à tanin, un
travail préliminaire a été réalisé en s’inspirant de la méthodologie adoptée par OLIVIER et
al (2019). Une centaine de coupe ont été effectuées sur lesquelles les cellules à tanin ont
été dénombrées en utilisant un microscope optique équipé d’un oculaire gradué
préalablement étalonné, pour le calcul des surfaces considérées lors des comptages (Cet
étalonnage a été réalisé à l’aide d’une lame micrométrique pour chaque objectif du
microscope). En effet, nous avons commencé tout d’abord par effectuer un comptage sur
une surface carrée de 0,03mm² en prenant en considération trois zones de comptage : le
centre et les deux extrémités de la coupe. Nous avons ensuite élargi la surface de comptage
à 0,05 mm² et en dernier nous avons procédé à un comptage sur la totalité de la coupe.
L’exploitation des résultats de ce travail préliminaire nous a permis de confirmer la non
fiabilité des deux premières méthodes et ce, en raison de l’absence d’homogénéité et de
symétrie de distribution des cellules à tanin le long de la coupe elle-même. C’est pour cette