Matériel et méthodes
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Technique :
1. Préparation de l’inoculum :
- A partit d’une culture jeune (18h-24h) sur milieu d’isolement approprié, on prélève 2 à
3 colonies bien isolées à l’aide d’une anse de platine.
- Décharger bien l’anse dans un tube contenant 5ml de l’eau physiologique stérile afin
de préparer une solution bacterienne de 0,5 Mc Farland (10
8 cellules /ml)
- L’inoculum bactérien doit idéalement être employé dans les 15 minutes qui suivent sa
préparation.
2. Ensemencement :
- Plonger un écouvillon stérile dans la suspension bactérienne et éliminer l’excès de
liquide.
- Ecouvillonner sur la totalité de la surface de la gélose dans trois directions (60°), sans
oublier de faire pivoter l’écouvillon sur lui-même afin d’assurer une bonne distribution
de l’inoculum.
3. Le dépôt des disques :
- Déposer les disques d’antibiotiques (Tableau 2) à la surface de la gélose inoculée. Le
contact avec la surface doit être étroit, à l’aide d’une pince stérile selon la figure (14).
- Les disques une fois déposés ne peuvent être déplacés car la diffusion des
antibiotiques est très rapide.
- Incuber les boites dans les 15min qui suivent le dépôt des disques à 37°C pendant 1824h.