Matériel et méthodes
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II.3 Détermination des paramètres physicochimiques
II.3.1 Potentiel hydrogène et temperature
Le pH est mesuré par une électrode (méthode électrochimique.). Un pH-mètre portable a été
utilisé. L’électrode est plongée directement dans l’eau de mer.Après chaque utilisation
l’électrode est rincée à l’eau distillée.
II.4 Analyse microbiologique
II.4.1 L’eau de mer
L’analyse de l’eau de mer a été réalisée par la méthode de filtration sur membrane, c’est la
méthode la plus utilisée au laboratoire, pour sa facilité de dénombrement et sa
reproductibilité. L’échantillon à analyser est filtré à travers une membrane stérile quadrillée
avec un diamètre de pores 0.45µm ; qui retient les microorganismes recherchés. (RODIER J.
et al., 2009).
La membrane est ensuite placée sur un milieu gélosé selon les bactéries recherchées ; cette
méthode nous a permis le dénombrement des coliformes totaux, des coliformes
thermotolérants, et les entérocoques. Durant l’incubation, des colonies se forment à la surface
de la membrane, donc le nombre de colonies trouvées sera exprimé par Unité Formant
Colonie dans 100ml d’eau (UFC/100ml). (RODIER J. et al., 2009).
Mode opératoire :
On a raccordé les différents composants de la rampe de filtration puis désinfecté avec de
l’alcool et flambée la plaque poreuse et l’entonnoir de la rampe.
On a placé une membrane stérile de 0.45µm, côté quadrillée vers le haut ; sur le disque
poreux on ne saisissant que le bord extérieur de la membrane à l’aide d’une pince stérile puis
bien placée l’entonnoir stérile.
Un volume de 100ml de l’échantillon (et ou dilution de 10
-1 à 10
-3 ) est filtré. Après filtration
la membrane est transférée dans une boite de pétri contenant le milieu adéquat selon le germe
recherché :
II.4.1.1 Coliformes totaux
La membrane est incubée dans le milieu Tergitol à 37°C pendant 24-48h.
II.4.1.2 Coliformes fécaux
La membrane est incubé dans le milieu Tergitol à 44°C pendent 24-48h.
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II.3 Détermination des paramètres physicochimiques
II.3.1 Potentiel hydrogène et temperature
Le pH est mesuré par une électrode (méthode électrochimique.). Un pH-mètre portable a été
utilisé. L’électrode est plongée directement dans l’eau de mer.Après chaque utilisation
l’électrode est rincée à l’eau distillée.
II.4 Analyse microbiologique
II.4.1 L’eau de mer
L’analyse de l’eau de mer a été réalisée par la méthode de filtration sur membrane, c’est la
méthode la plus utilisée au laboratoire, pour sa facilité de dénombrement et sa
reproductibilité. L’échantillon à analyser est filtré à travers une membrane stérile quadrillée
avec un diamètre de pores 0.45µm ; qui retient les microorganismes recherchés. (RODIER J.
et al., 2009).
La membrane est ensuite placée sur un milieu gélosé selon les bactéries recherchées ; cette
méthode nous a permis le dénombrement des coliformes totaux, des coliformes
thermotolérants, et les entérocoques. Durant l’incubation, des colonies se forment à la surface
de la membrane, donc le nombre de colonies trouvées sera exprimé par Unité Formant
Colonie dans 100ml d’eau (UFC/100ml). (RODIER J. et al., 2009).
Mode opératoire :
On a raccordé les différents composants de la rampe de filtration puis désinfecté avec de
l’alcool et flambée la plaque poreuse et l’entonnoir de la rampe.
On a placé une membrane stérile de 0.45µm, côté quadrillée vers le haut ; sur le disque
poreux on ne saisissant que le bord extérieur de la membrane à l’aide d’une pince stérile puis
bien placée l’entonnoir stérile.
Un volume de 100ml de l’échantillon (et ou dilution de 10
-1 à 10
-3 ) est filtré. Après filtration
la membrane est transférée dans une boite de pétri contenant le milieu adéquat selon le germe
recherché :
II.4.1.1 Coliformes totaux
La membrane est incubée dans le milieu Tergitol à 37°C pendant 24-48h.
II.4.1.2 Coliformes fécaux
La membrane est incubé dans le milieu Tergitol à 44°C pendent 24-48h.