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en mg d’O 2 /l, a été mesuré par un Oxymètre « WTW Oxi 197i», (Aminaut et Chausspied,
1983).
II.4 Culture et Isolement des bactéries marines hydrocarbonoclastes.
Une fois au laboratoire, les échantillons d’eau et de sédiment ont été utilisé comme inoculum
pour l'enrichissement dans un milieu de culture spécifique ONR7a, un milieu synthétique
dont la composition imite celle de l’eau de mer mais qui manque à lui seul d’une source
principale de carbone, ce dernier est un milieux sélectif que pour le groupement des bactéries
hydrocarbonoclastes, en présence des hydrocarbures comme source de carbone l’ ONR7a
permet la culture des bactéries qui sont aptes à dégrader les hydrocarbures (Dyksterhouse et
al., 1995). La composition du milieu est la suivante:
Solution 1 :
NaCl
22.8 gr
Na 2 SO 4
3.98 gr
KCl
0.72 gr
NH 2 Cl
0.27 gr
TRIS
1.3 gr
NaBr (0,83 gr dans 10 ml)
1.3 gr
NaHCO 3 (1,55 gr dans 50 ml)
1 ml
H 3 BO 3 (1,35 gr dans 50 ml)
1 ml
NaF (0,13 gr dans 50 ml)
1 ml
Na 2 HPO 4 (4,45 gr dans 50 ml)
1 ml
Volume Final
600 ml
Transférer les constituants solides dans un bécher contenant de l’eau distillée (50 ml
moins que le volume final) et remuer avec un agitateur magnétique jusqu'à
solubilisation complète.
Ajouter tous les éléments traces sous hotte à flux chimique.
Ajuster le pH à 7,6 tout on ajoute quelques gouttes de HCl.
en mg d’O 2 /l, a été mesuré par un Oxymètre « WTW Oxi 197i», (Aminaut et Chausspied,
1983).
II.4 Culture et Isolement des bactéries marines hydrocarbonoclastes.
Une fois au laboratoire, les échantillons d’eau et de sédiment ont été utilisé comme inoculum
pour l'enrichissement dans un milieu de culture spécifique ONR7a, un milieu synthétique
dont la composition imite celle de l’eau de mer mais qui manque à lui seul d’une source
principale de carbone, ce dernier est un milieux sélectif que pour le groupement des bactéries
hydrocarbonoclastes, en présence des hydrocarbures comme source de carbone l’ ONR7a
permet la culture des bactéries qui sont aptes à dégrader les hydrocarbures (Dyksterhouse et
al., 1995). La composition du milieu est la suivante:
Solution 1 :
NaCl
22.8 gr
Na 2 SO 4
3.98 gr
KCl
0.72 gr
NH 2 Cl
0.27 gr
TRIS
1.3 gr
NaBr (0,83 gr dans 10 ml)
1.3 gr
NaHCO 3 (1,55 gr dans 50 ml)
1 ml
H 3 BO 3 (1,35 gr dans 50 ml)
1 ml
NaF (0,13 gr dans 50 ml)
1 ml
Na 2 HPO 4 (4,45 gr dans 50 ml)
1 ml
Volume Final
600 ml
Transférer les constituants solides dans un bécher contenant de l’eau distillée (50 ml
moins que le volume final) et remuer avec un agitateur magnétique jusqu'à
solubilisation complète.
Ajouter tous les éléments traces sous hotte à flux chimique.
Ajuster le pH à 7,6 tout on ajoute quelques gouttes de HCl.