MATERIEL ET METHODES
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Dosage des orthophosphates
Pour le dosage des orthophosphates, nous avons utilisé les réactifs suivants:
- Réactif R1 : Solution de molybdate d’ammonium (Dissoudre 15 g de paramolybdate
d’ammonium (NH 4 ) 6 MO 7 O 24 ,4H 2 O dans 500 ml d’eau distillée).
- Réactif R2: (H 2 SO 4 ) d’acide sulfurique à 2.5 mol/l (Ajouter avec précaution 140ml
d’acide sulfurique à 900 ml d’eau distillée).
- Réactif R3 : Solution d’acide ascorbique (Dissoudre 54 g d’acide ascorbique C 6 H 8 O 6
dans 500 ml d’eau distillée. Cette solution se conserve dans un flacon en plastique
plusieurs mois au congélateur et quelques semaines au réfrigérateur dans un flacon
protégé de la lumière).
- Réactifs R4 : Solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine (Dissoudre 0.34 g
d’oxytartrate de potassium et d’antimoine K(SbO)C 4 H 4 O 6 dans 250 ml d’eau
distillée).
- Mélange des réactifs 1, 2, 3 et 4. Pour un échantillon, nous avons mélangé les réactifs
ci-dessus dans les proportions suivantes (le mélange est préparé juste avant l’analyse):
- 2 ml de solution de molybdate d’ammonium.
- 5ml d’acide sulfurique à 2.5 mol/l.
- 2ml de solution d’acide ascorbique.
- 1ml de solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine.
- Solution étalon primaire de phosphate. Dissoudre 0 .6805 g de dihydrogénophosphate
de potassium anhydre (KH 2 PO 4 ) séché à 100°C dans 1l d’eau distillée et ajouter 1ml
de chloroforme. 1ml de cette solution contient 5µmol de PO
3
4 -
- Solution étalon secondaire de phosphate. Diluer 100 fois la solution étalon primaire
(R6) puis prendre 10 ml de cette solution et la compléter à 1000 ml avec de l’eau
distillée. Conserver la solution dans un flacon brun avec 1ml de chloroforme. 1ml de
cette solution contient 0.05µmol de PO
3
4 -
Pour l’analyse, nous avons mis 100 ml de l’échantillon et ajouté 10 ±0.5 ml de réactifs
R5 dans une fiole. Nous avons mélangé et laissé reposer 5 minutes. L’absorbance est mesurée
à 885 nm et la concentration est obtenue à partir de la courbe d’étalonnage (Figure 41) tracée
selon le protocole d’Aminot et Chaussepied (1983).
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Dosage des orthophosphates
Pour le dosage des orthophosphates, nous avons utilisé les réactifs suivants:
- Réactif R1 : Solution de molybdate d’ammonium (Dissoudre 15 g de paramolybdate
d’ammonium (NH 4 ) 6 MO 7 O 24 ,4H 2 O dans 500 ml d’eau distillée).
- Réactif R2: (H 2 SO 4 ) d’acide sulfurique à 2.5 mol/l (Ajouter avec précaution 140ml
d’acide sulfurique à 900 ml d’eau distillée).
- Réactif R3 : Solution d’acide ascorbique (Dissoudre 54 g d’acide ascorbique C 6 H 8 O 6
dans 500 ml d’eau distillée. Cette solution se conserve dans un flacon en plastique
plusieurs mois au congélateur et quelques semaines au réfrigérateur dans un flacon
protégé de la lumière).
- Réactifs R4 : Solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine (Dissoudre 0.34 g
d’oxytartrate de potassium et d’antimoine K(SbO)C 4 H 4 O 6 dans 250 ml d’eau
distillée).
- Mélange des réactifs 1, 2, 3 et 4. Pour un échantillon, nous avons mélangé les réactifs
ci-dessus dans les proportions suivantes (le mélange est préparé juste avant l’analyse):
- 2 ml de solution de molybdate d’ammonium.
- 5ml d’acide sulfurique à 2.5 mol/l.
- 2ml de solution d’acide ascorbique.
- 1ml de solution d’oxytartrate de potassium et d’antimoine.
- Solution étalon primaire de phosphate. Dissoudre 0 .6805 g de dihydrogénophosphate
de potassium anhydre (KH 2 PO 4 ) séché à 100°C dans 1l d’eau distillée et ajouter 1ml
de chloroforme. 1ml de cette solution contient 5µmol de PO
3
4 -
- Solution étalon secondaire de phosphate. Diluer 100 fois la solution étalon primaire
(R6) puis prendre 10 ml de cette solution et la compléter à 1000 ml avec de l’eau
distillée. Conserver la solution dans un flacon brun avec 1ml de chloroforme. 1ml de
cette solution contient 0.05µmol de PO
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Pour l’analyse, nous avons mis 100 ml de l’échantillon et ajouté 10 ±0.5 ml de réactifs
R5 dans une fiole. Nous avons mélangé et laissé reposer 5 minutes. L’absorbance est mesurée
à 885 nm et la concentration est obtenue à partir de la courbe d’étalonnage (Figure 41) tracée
selon le protocole d’Aminot et Chaussepied (1983).