Matériel et méthodes
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Figure 8: Protocole d'extraction des caroténoïdes (VICTOR et al., 1995 in SADOUN et BENYOUNES;
2005).
Evaporation du solvant dans un
rotavapeur à 40°C
Agitation 30 à 60 secondes
Filtration dans un ballon avec papier
wattman
Lavage avec 20ml d‟Hexane
Phase organique
Réextraction 2 à 3 fois par 40 ml
d‟Ethanol-Hexane (1 :1)
Obtention d‟un concentré de
pigments caroténoïdes
Décantation de différentes fractions du solvant dans
une ampoule à décanter avec l‟ajout de 25 ml d‟Hexane
et de 20 ml d‟eau distillée
Dilution du concentré avec 25 ml
d‟hexane
L‟ajout de 999 ml d‟hexane à
1 ml de la solution prélevée
Lecture au spectrophotomètre
à 450 nm
Réextraction jusqu'à décoloration et épuisement du
résidu
Chauffage du mélange 10 minutes à 40°C, puis
refroidissement dans un bac de glace
L‟ajout du même volume de KOH méthanoïque à 10%
que le volume obtenu et le mettre dans un flacon brun
Filtration sous vide de 5g de spiruline avec
40ml d‟Ethanol-Hexane (1 :1)
Phase aqueuse