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NUTRITION CABBONÊE DE LA PLANTE
place qu’occupent dans la molécule les atomes de C marqué, place
connue en dégradant progressivement cette molécule en fragments et
'
enn les concentrations respectives de ces composés.
(3) Étude cinétique du phénomène : exposition au 140 de durée limitée
“
et de plus en plus brève. — Le régime de la photosynthèse étant établi
en
absence totale de
marqué, on introduit très rapidement dans le
'
milieu du 14CO2 ou du H14C03— puis on xe les cellules après un temps t
en les faisant tomber dans l’alcool bouillant (voir, par exemple, le dis—
positif dc la g. 221) ; on recherche la localisation du 14C en fonction de
la durée d’exposition au 14C. Plus cette durée est brève plus le nombre
de composés marqués est faible. Cette étude cinétique permet de déterminer l’ordre d’apparition, dans le temps, des divers composés. En
;
opérant avec des durées d’exposition au 14C de plus en plus courtes, on
doit idéalement aboutir à isoler le premier corps où s’incorpore le 14C..
y) Établissement du régime permanent, puis variations soudaines des
conditions de la photosynthèse. — On peut, une fois le régime permanent établi en présence de 14CO,, modier brusquement ‘un facteur du
milieu :
—
en
coupant la lumière;
——
en faisant varier la température;
_
,
—
en
interrompant l’arrivée du CO,;
——
en introduisant l’un des corps réagissant;
_
——
en introduisant des inhibiteurs des enzymes supposés intervenir.
Après l’intervention perturbatrice du régime permanent, on fait
immédiatement des prises périodiques et on enregistre les modications
survenues : accumulation d’un corps, disparition d’un corps, etc.
—
2) Les résultats.
_
.
a) La xation du CO,. —- Des Ghlorelles, photosynthétisant sur
milieu enrichi en C0, normal, sont brusquement exposées à un apport
de 14CO,, puis très rapidement précipitées dans le méthane] bouillant.
Au bout de cinq secondes, par exemple, les'tachés radio—actives obtenues
par chromatographie de l’extrait de Chlorelle sont “très peu
L’autoradiographie en révèle trois principales
à l’acide
phosphoglycérique, à l’acide phosphopyruvique et à l’acide maliqüe; Au
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