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‘i- Lagoioration cytochimique preprement dite.
-
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-
Elle c‘onsiste en une: _micr0reaction chimique, effectuee sur une coupe,
'
mettanten évidence une combinaison coloree entre la substance a deceler et
un réactif approprié. En microsœpie electronique, c'est un accroissement de
_
la densité qui signe la positivite de la reaction. Contrairement aux colorations
topographiques, celles—ci ne sont pas empiriques; leurs mecanismes sont
connus.
'
'
Exemple : mise en évidence des polygaccharides, au microscope optique, à l'aide de la
coloration au P.A.S. (acide periodique, Schiff).
ler temps :_ oxydation des polysaccharides par l'aCide periodique, dans lequel on plonge
*
les coupes; il en résulte“ l’apparition de groupements aldéhyde libres;
2ème temps : le réactif de Schiff (fuchsine décolorée) est coloré en rouge en présence
_
de groupements. aldéhyd_e; la_coloration__rouge signe donc la présence de
_
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polyæçchar_ides,_.
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.
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Pour être valable, une coloration cytochimique doit être spécifique : elle
ne doitpas colorer en meme temps deux substances différentes.
24 La digestion ehz“ÿmàtique;
'
Pour augmenter cette spécificité, on peut faire disparaître la substance a
detecter grace a une enzyme hydrolytique spécifique. On compare alors
deux coupes identiques : l'une etant coloree normalement, par les méthodes
topographiques“ ou histochiniques,_i'autre etant colorée de la même façon
eprss‘ê9t'O—n @îwe hyd‘rc‘>lase.“
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,
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Exemple : miseÏ=en évidence de l'ARN-sur les nucléo/es, ,en microscopie optique.:,
d‘une coupe par la pyronine : les nucléole5 apparaissent en rose;
'
…
_-,
très semblable, par
la pyronine aprés
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de la RNase : _ “les
pas colorés.
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dernierscontiennent de l'ARN.
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Exemple "“se enevndenœdu glÿcbÿépe dans le foie, au microscope optique :
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Cestunemethodetœsseec'f'quefaisantappelalanotiondantlgene et. '
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sur la?bremièfeÿ pour
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