CHAPITRE III : MATERIEL ET METHODES
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Figure III.11 a. Traitement au mercure ; b. Concentration sous jet d'azote
III.5.8. Analyse SFUV
L’analyse des HAPs par Spectrofluorométrie ultraviolet est une technique qui permet de quantifier
les hydrocarbures déjà extraits et purifiés d’une matrice donnée. Le principe de la méthode consiste
à émettre un rayonnement d’excitation UV de 310 nm, l’appareil mesure ensuite l’intensité de
fluorescence émise par l’échantillon dans un intervalle de 310 à 500 nm pour une longueur d’onde
fixée à 360 nm. Les concentrations sont enfin calculées à partir d’une courbe d’étalonnage.
1. Préparation de la gamme d’étalonnage
La réalisation d’une courbe d’étalonnage permet de tirer les concentrations des échantillons après
la lecture des intensités de florescence.
La méthode consiste à préparer une solution mère de 100 µg/L de concentration en diluant 1 mg
d’un HAP de référence, le Chrysène, dans une fiole de 10 mL remplie d’hexane.
Les standards sont par la suite préparés à partir de la solution mère avec des concentrations bien
connus. Les fioles contenant les solutions filles sont placées dans un bac à ultrasons pour une
agitation de 4 minutes afin de les bien homogénéiser.
Standards
S1
S2
S3
S4
S5
Concentration (µg/mL)
0,2
0,4
0,6
0,8
1