Chapitre II : Matériel et méthodes
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Figure 19 : Préparation du milieu de culture de L. pneumophilla
Mode opératoire selon le fabriquant Mast Group Ltd :
- Mettre dans un bain marie 4 flacons contenant 250ml de milieu BCYE pour le faire
fondre ;
- Utiliser de l'eau de javel pour désinfecter la paillasse et allumer le bec bunsen ;
- Préparer 2 flacons de 500 ml en verre stériles ;
- Prévoir 2 flacons de "supplément de croissance Legionella" et de "supplément sélectif
Legionella", verser respectivement 25 ml et 10 ml d'eau distillée ;
- Lorsque le milieu est bien liquide, le retirer du bain marie et le laisser tiédir légèrement
sous l'eau de robinet ;
- Verser deux flacons de 250 ml de milieu BCYE dans un flacon stérile de 500 ml, ajouter
le supplément de croissance et le supplément sélectif, puis compléter les flacons avec
du milieu BCYE jusqu'à la jauge ;
- Fermer les flacons et les secouer soigneusement ;
- Couler les boîtes et flamber celles-ci pour éliminer les bulles d'air avant de les fermer ;
- Laisser le milieu se solidifier ;
- Les boîtes préparées sont utilisables immédiatement ou conservables à 2-8 °C dans des
sacs en plastique pour une durée pouvant aller jusqu'à plus d'une semaine.
Milieu
de
culture
Supplément
sélectif
Supplément
de croissance