Annexes
Annexe 1: Coloration de Gram
Différentes étapes de cette coloration:
 Préparer et fixer un frottis bactérien à la chaleur du bec bunsen
 Coloration par le violet de gentiane, laisser agir pendent 1mn après rincer à l'eau de
robinet.
 Ajouter du Lugol (solution d'iode iodo-iodurée): étaler le Lugol et laisser agir 20
secondes. Rincer avec l'eau.
 Décoloration de l'alcool: verser goutte à goutte l'alcool sur la lame, et surveiller la
décoloration (5à10 secondes). Le filet doit être clair à la fin de la décoloration. Rincer
sous filet d'eau.
 Recoloration à la fuchsine. Laisse agir de 30 secondes à 1mn. Rinçage à l'eau puis
séchage.
 Observer avec une goutte d'huile à immersion, objectif 100 (grossissement ×100)
 Les bactéries à Gram positif se colorent en violet alors que les bactéries à Gram
négatif se colorent en rose.