ANNEXE 3g
Protocoles de prélèvement
ÉTUDES BIOLOGIQUES, ÉCOLOGIQUES ET DE SANTÉ
L'estimation de l'âge et des paramètres biologiques qui lui sont associés (âge
à la maturité sexuelle, croissance, longévité ...) est indispensable aux études
démographiques des populations naturelles. La squelettochronologie constitue
une méthode crédible de détermination de l'âge chez les tortues. Son principe
est fondé sur le dénombrement des marques de croissance squelettiques enregistrées
annuellement sur diverses structures osseuses d’animaux poïkilothermes telles
que les tortues dont le rythme de croissance est interrompu ou discontinu. Ces
interruptions de croissance sont en effet traduites par des stries d’arrêt de croissance
sur certaines pièce squelettiques.
Dans le cas des tortues marines, l’humérus est utilisé pour cette fin que nous pouvons
récupérer aisément des tortues échouées mortes et éviter tout sacrifice de ces animaux
menacés.
Il est à signaler par ailleurs que cette étude de l’âge doit se faire par un expert
en la matière mais au niveau du réseau d’échouage, l’essentiel est de collecter
des échantillons et des données pour la communauté scientifique surtout que le matériel
(humérus) se conserve longtemps.
A- Détermination de l'âge :
DÉTERMINATION DE L'ÂGE D'UNE TORTUE MARINE SELON SNOVER (2002)
© Brown & Madara
© Brown & Madara
Emplacement de l'humérus
Stries d’arrêt de croissance
sur une coupe d’humérus
Récupération et préparation de l’humérus pour la lecture des stries d’arrêt de croissance :
1- Dissection de la tortue morte et récupération l’humérus ;
2- Le faire nettoyer, bouillir puis sécher à l’aire libre pendant environ 2 semaines ;
3- Section d’une portion de l’humérus de l’ordre de 2 à 3 mm en utilisant un microtome approprié
4- Fixation de la section par le formol (10%) pour rendre l’os plus dur lors de la décalcification
et la coupe) ;
5- Décalcification de la section par un agent de décalcification. Le temps de décalcification dépend
de la taille de l’os (Humérus) et de la puissance de la solution de décalcification (12 - 36h).
La décalcification a pour but d’éliminer le maximum de calcium pour mieux visualiser les stries ;
6- Rendre la section plus mince par l’utilisation d’un microtome à congélation (la section obtenue
sera de l’ordre de 25 μm) ;
7- Ajout d’une solution d’hématoxyline diluée dans de l’eau distillée (1:1) pour visualisation
des stries d’arrêt de croissance ;
8- Montage de la section dans de la glycérine (100%) pour lecture sous la loupe binoculaire.
Protocoles de prélèvement
ÉTUDES BIOLOGIQUES, ÉCOLOGIQUES ET DE SANTÉ
L'estimation de l'âge et des paramètres biologiques qui lui sont associés (âge
à la maturité sexuelle, croissance, longévité ...) est indispensable aux études
démographiques des populations naturelles. La squelettochronologie constitue
une méthode crédible de détermination de l'âge chez les tortues. Son principe
est fondé sur le dénombrement des marques de croissance squelettiques enregistrées
annuellement sur diverses structures osseuses d’animaux poïkilothermes telles
que les tortues dont le rythme de croissance est interrompu ou discontinu. Ces
interruptions de croissance sont en effet traduites par des stries d’arrêt de croissance
sur certaines pièce squelettiques.
Dans le cas des tortues marines, l’humérus est utilisé pour cette fin que nous pouvons
récupérer aisément des tortues échouées mortes et éviter tout sacrifice de ces animaux
menacés.
Il est à signaler par ailleurs que cette étude de l’âge doit se faire par un expert
en la matière mais au niveau du réseau d’échouage, l’essentiel est de collecter
des échantillons et des données pour la communauté scientifique surtout que le matériel
(humérus) se conserve longtemps.
A- Détermination de l'âge :
DÉTERMINATION DE L'ÂGE D'UNE TORTUE MARINE SELON SNOVER (2002)
© Brown & Madara
© Brown & Madara
Emplacement de l'humérus
Stries d’arrêt de croissance
sur une coupe d’humérus
Récupération et préparation de l’humérus pour la lecture des stries d’arrêt de croissance :
1- Dissection de la tortue morte et récupération l’humérus ;
2- Le faire nettoyer, bouillir puis sécher à l’aire libre pendant environ 2 semaines ;
3- Section d’une portion de l’humérus de l’ordre de 2 à 3 mm en utilisant un microtome approprié
4- Fixation de la section par le formol (10%) pour rendre l’os plus dur lors de la décalcification
et la coupe) ;
5- Décalcification de la section par un agent de décalcification. Le temps de décalcification dépend
de la taille de l’os (Humérus) et de la puissance de la solution de décalcification (12 - 36h).
La décalcification a pour but d’éliminer le maximum de calcium pour mieux visualiser les stries ;
6- Rendre la section plus mince par l’utilisation d’un microtome à congélation (la section obtenue
sera de l’ordre de 25 μm) ;
7- Ajout d’une solution d’hématoxyline diluée dans de l’eau distillée (1:1) pour visualisation
des stries d’arrêt de croissance ;
8- Montage de la section dans de la glycérine (100%) pour lecture sous la loupe binoculaire.