La chromatographie, généralités
La chromatographie est une méthode physique de séparation basée sur la différence
d’affinité d ’une substance entre deux phases, l’une stationnaire ou fixe, l’autre mobile.
La phase mobile (éluant) entraîne le mélange à séparer et la phase fixe sépare progressivement les constituants selon deux critères :
• leur adsorption et leur désorption successive sur la phase stationnaire,
• leur solubilité différente dans chaque phase.
On récupère à la sortie le mélange de l’éluant et des constituants séparés (schéma).
Un coefficient de partition K est défini par le rapport de la masse de soluté dans la
phase stationnaire par unité de volume
et de la masse de soluté dans la phase
mobile par unité de volume (ms ). Soit K = ms ms
^
^ nm ^
ps/
Mélange
p n r
Flux de l'éluant
pm.
Réception des
constituants
= >
séparés
Phase stationnaire
Ségrégation des constituants, différemment accrochés par la phase stationnaire
•a
O
c
13
Q
1
O
rsj
X I
>•
Q .
O
U
1. Les différentes méthodes chromatographiques
On peut classer les méthodes chromatographiques d ’après la nature des phases utilisées
ou celle des phénomènes intervenant dans la séparation.
M Phases stationnaires
La phase stationnaire peut être solide ou liquide. Différentes sortes de silice ou d’alumine traitées permettent, grâce à leurs propriétés adsorbantes, la séparation des composants des mélanges étudiés. Ces solides sont employés pour remplir une colonne. La
chromatographie à haute performance sous pression (HPLC : High Pressure Liquid
Chromatography) utilise également ce procédé. La phase stationnaire peut aussi être
étalée en couche mince sur une plaque de verre, d’aluminium ou sur une feuille de
matière plastique ; on parle alors de la chromatographie en couche mince (CCM).
La phase fixe peut aussi être constituée par un liquide imprégnant un support solide ou
être greffée sur un support neutre sous la forme d’une chaîne carbonée. Le papier peut
être aussi utilisé, la phase fixe est alors formée par l’eau que les molécules de cellulose
du papier adsorbent. La phase stationnaire peut également être constituée par un liquide
stable, peu volatil, imprégnant un composé granulé poreux. Cette technique est utilisée
dans la chromatographie en phase gazeuse.
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La chromatographie est une méthode physique de séparation basée sur la différence
d’affinité d ’une substance entre deux phases, l’une stationnaire ou fixe, l’autre mobile.
La phase mobile (éluant) entraîne le mélange à séparer et la phase fixe sépare progressivement les constituants selon deux critères :
• leur adsorption et leur désorption successive sur la phase stationnaire,
• leur solubilité différente dans chaque phase.
On récupère à la sortie le mélange de l’éluant et des constituants séparés (schéma).
Un coefficient de partition K est défini par le rapport de la masse de soluté dans la
phase stationnaire par unité de volume
et de la masse de soluté dans la phase
mobile par unité de volume (ms ). Soit K = ms ms
^
^ nm ^
ps/
Mélange
p n r
Flux de l'éluant
pm.
Réception des
constituants
= >
séparés
Phase stationnaire
Ségrégation des constituants, différemment accrochés par la phase stationnaire
•a
O
c
13
Q
1
O
rsj
X I
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Q .
O
U
1. Les différentes méthodes chromatographiques
On peut classer les méthodes chromatographiques d ’après la nature des phases utilisées
ou celle des phénomènes intervenant dans la séparation.
M Phases stationnaires
La phase stationnaire peut être solide ou liquide. Différentes sortes de silice ou d’alumine traitées permettent, grâce à leurs propriétés adsorbantes, la séparation des composants des mélanges étudiés. Ces solides sont employés pour remplir une colonne. La
chromatographie à haute performance sous pression (HPLC : High Pressure Liquid
Chromatography) utilise également ce procédé. La phase stationnaire peut aussi être
étalée en couche mince sur une plaque de verre, d’aluminium ou sur une feuille de
matière plastique ; on parle alors de la chromatographie en couche mince (CCM).
La phase fixe peut aussi être constituée par un liquide imprégnant un support solide ou
être greffée sur un support neutre sous la forme d’une chaîne carbonée. Le papier peut
être aussi utilisé, la phase fixe est alors formée par l’eau que les molécules de cellulose
du papier adsorbent. La phase stationnaire peut également être constituée par un liquide
stable, peu volatil, imprégnant un composé granulé poreux. Cette technique est utilisée
dans la chromatographie en phase gazeuse.
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